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翌圣生物科技（上海）股份有限

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供應簡介

GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等）支原體感染的檢測。它綜合了幾個優勢：靈敏、特異、快速并且可以用直接用細胞培養上清液檢測。

詳細介紹

產品簡介：

GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等）支原體感染的檢測。它綜合了幾個優勢：靈敏、特異、快速并且可以用直接用細胞培養上清液檢測。本制品通過PCR方法檢測培養細胞等生物材料中的支原體，所用引物為根據支原體16S-23S rRNA序列保守區域設計，只特異性擴增支原體DNA，檢出靈敏度與特異性均較高。PCR擴增及電泳分析只需數個小時，操作方便簡單。

產品組分及保存：

1.試劑盒包裝清單：

試劑名	保存條件	容量	貨號
GMyc-1st PCR Mix	-20℃	500µl	GM-83599-1
GMyc-1st PCR Mix	-20℃	1ml（2×500µl）	GM-83599-2

注1：長期不用時，可-80℃冷凍保存。

注2：PCR反應極其靈敏，為防止假陽性，加樣時，zui后加陽性對照。

2.試劑盒以外自備實驗儀器及試劑：

器材	試劑
PCR儀	瓊脂糖
PCR反應管	GelRed或EB
電泳儀及水平電泳槽	去離子水或雙蒸水
離心機
微量移液器及移液器吸頭

實驗流程：

此PCR反應為巢式PCR，*輪PCR結束后，取其反應產物為第二輪PCR模板。根據兩輪PCR產物電泳條帶之有無及片段大小來分析結果。貼壁細胞培養3-6天后，直接取其上清液進行PCR反應。為排除細胞培養基抑制PCR反應，陽性對照中需加入等量的細胞上清液。懸浮細胞不能作為樣品直接檢測，會干擾PCR反應，需提取DNA并進行PCR。

*輪PCR：

1.充分融解Myco-1st PCR Mix，按下列表格配制反應液：

試劑	實驗組	陽性對照	陰性對照
Myco-1st PCR Mix	46µl	46µl	46µl
樣品 ddH₂O	4µl	4µl	4µl
Positive Control Template^注¹		1µl

注1：為防止Positive Control Template污染，請將實驗組和陰性對照組加完以后，zui后再將

Positive Control Template加入陽性對照組。

2.按下列條件進行PCR反應:

94℃	3 min
94℃	30 s	30~35 cycles
55℃	2 min
72℃	1 min
72℃	10 min

第二輪PCR：

1. 充分融化引物及PCR Mix，按下列表格配制反應液：

試劑	實驗組	陽性對照	陰性對照
Myco-2nd PCR Mix	24µl	24µl	24µl
1st PCR反應液	1µl	1µl	1µl

2.按下列條件進行PCR反應：

94℃	3 min
94℃	30 s	30~35 cycles
55℃	2 min
72℃	1 min
72℃	10 min

反應結束后，取10 μl 的PCR反應液進行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，確認PCR擴增產物。

推薦使用頻率：

新細胞進入實驗室	必檢
液氮保存前	必檢
定期常規	每月檢測一次
發現污染后	每周檢測一次
發現細胞異常	隨時檢測

注意事項：

1. 使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

2. 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行，以避免交叉污染。

3. 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

4. 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5. 細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。

6. 為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。

訂購信息

貨號	名稱	產地	規格	報價	*（元）
GM-83599-1	GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原體檢測試劑盒	Genomeditech	10 assays	1120	896
GM-83599-2	GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原體檢測試劑盒	Genomeditech	20 assays	1764	1411

400-6111-883

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