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上海淳麥生物科技有限公司

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GV3101 電轉化感受態(tài)細胞
  • GV3101 電轉化感受態(tài)細胞
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貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-06-19 21:00:07

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上海淳麥生物科技有限公司在感受態(tài)細胞的研發(fā)方面,實力雄厚,擁有了克隆、表達、酵母和農桿菌4大類,共計百余種感受態(tài)細胞。在電擊感受態(tài)方面,擁有了大腸桿菌 電轉化感受態(tài)細胞和農桿菌電擊感受態(tài)種類,極大提高了客戶在轉基因以及文庫構建方面的成功率。
貨號:CM-6058G
供應商:上海淳麥
數(shù)量:1000只
英文名:JM109Chemically Competent Cell
保質期:1年
保存條件:零下80度
規(guī)格:20*100ul


 

GV3101農桿菌電轉感受態(tài)細胞


GV3101 Electroporation-Competent Cell

產品編碼:                          保存條件: -80℃   
產品規(guī)格:

GV310120×50μl
pCAMBIA2301control vector10ng/ul       10ul

                
GV3101農桿菌電轉感受態(tài)細胞基因型:
C58 (rif R) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR/strepR) Nopaline

GV3101農桿菌電轉感受態(tài)細胞簡要說明:
 GV3101菌株為C58型背景,核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因rif,為了便于轉化操作,此菌株攜帶一無自身轉運功能的胭脂堿型Ti質粒pMP90 (pTiC58DT-DNA),此質粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞,但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移)。
pMP90 (pTiC58DT-DNA)Ti 質粒含有篩選標簽:Strepgent,賦予GV3101菌株鏈霉素和慶大霉素抗性,適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉基因操作。
 開發(fā)的GV3101電轉感受態(tài)特別適用于大質粒的轉化:經pCAMBIA2301質粒(size:11633bp)檢測轉化效率可達5×104cfu/μg;經pCAMBIA2301-ZH質粒(size:40kd)檢測轉化效率可達5×103cfu/μg。

GV3101農桿菌電轉感受態(tài)細胞操作說明:
1. 0.2cm電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。

  1.  -80℃保存的農桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘,待其融化,加入1-5ug質粒DNA(質粒體積不大于6ul,用試劑盒抽提,雙蒸水溶解),用手管底混勻,立即插入冰中,用200ul槍頭將感受態(tài)-質?;旌衔锟焖僖频诫姄舯?,蓋上杯蓋,空管保留待用。
  2.  啟動電轉儀,設置參數(shù):C=25uF,PC=200ohm,V=2400V(此參數(shù)為Biorad 推薦,使用者也可按所用電轉儀推薦的protocol操作),將電擊杯快速放入電轉槽中,電擊完成快速插入冰中,加入700ul 無抗生素的LB并轉移到感受態(tài)空管中,28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。

4. 6000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LBYEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天(當平板只含有50ug/ml kan 時,28℃培養(yǎng)48h即可;平板中同時加入50ug/ml kan,20ug/ml rif 時,需28℃培養(yǎng)60h;如果使用的平板含有50ug/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90h)。

GV3101農桿菌電轉感受態(tài)細胞

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