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核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取
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更新時(shí)間:2025-05-21 09:50:35

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研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復(fù)雜的大分子混合物中分離純化出來(lái),得到高純度具有生物學(xué)活性的目的物。因此,高效的純化技術(shù)和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎(chǔ)和關(guān)鍵之一。

服務(wù)說(shuō)明

研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復(fù)雜的大分子混合物中分離純化出來(lái),得到高純度具有生物學(xué)活性的目的物。因此,高效的純化技術(shù)和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎(chǔ)和關(guān)鍵之一。
蛋白質(zhì)是包括人類(lèi)在內(nèi)的各種生物有機(jī)體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳和繁殖等一切生命活動(dòng)都離不開(kāi)蛋白質(zhì)。 里來(lái)生物技術(shù)優(yōu)勢(shì)

1)高效蛋白提取液進(jìn)行高質(zhì)量蛋白的提取,同時(shí)高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
2)里來(lái)生物擁有多年的Western Blot檢測(cè)經(jīng)驗(yàn),為客戶提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù);
3)里來(lái)生物為客戶設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn),根據(jù)客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。

服務(wù)項(xiàng)目

規(guī)格

價(jià)格

/脂肪總蛋白提取

/

¥60.00

//質(zhì)/漿蛋白提取

/

¥60.00


里來(lái)生物技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1)高效蛋白提取液進(jìn)行高質(zhì)量蛋白的提取,同時(shí)高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
2)里來(lái)生物擁有多年的Western Blot檢測(cè)經(jīng)驗(yàn),為客戶提供專(zhuān)業(yè)的技術(shù)服務(wù);
3)里來(lái)生物為客戶設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn),根據(jù)客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。

核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取


核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取


核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取



核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取


實(shí)驗(yàn)樣品要求:
1)細(xì)胞不少于5×106個(gè);
2)組織樣品不少于50mg
3)總蛋白濃度不低于 2μg/μl(至少50μl);

注意事項(xiàng):
1)每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個(gè)樣品。一般狀況下,2周即可完成實(shí)驗(yàn)。如遇特殊情況,如一抗不好,蛋白濃度低或蛋白特殊,如分子量大等,周期會(huì)有所延長(zhǎng)。

2Western Blot細(xì)胞蛋白樣本的準(zhǔn)備及運(yùn)輸:去掉培養(yǎng)液,用PBS洗一次后,加入少量PBS,用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下,用1ml槍吸取細(xì)胞易于1.5ml EP管中,快速離心(升至轉(zhuǎn)速就可stop)去除上清后,可按下面兩種方法運(yùn)輸:A.細(xì)胞干運(yùn)輸:將細(xì)胞干放入液氮速凍,-80℃保存; 如需長(zhǎng)途過(guò)夜運(yùn)輸,建議干冰運(yùn)輸;如當(dāng)天送達(dá)樣本,可用液氮或者-80℃冰袋運(yùn)輸;B.細(xì)胞裂解液運(yùn)輸:加入一定量的胞裂解液后即可冷藏運(yùn)輸(冰袋或者冰盒)。如需檢測(cè)磷酸化蛋白,建議裂解液中加入終濃度1mMNaFNaF可抑制磷酸酶活性,保護(hù)蛋白磷酸化水平。如果加入裂解液后提取蛋白,則置于冰上裂解1 h12000rpm離心10 min后取上清,即為蛋白樣本。蛋白樣本可-20度冷藏運(yùn)輸(建議快遞寄送用干冰或者足量-80度冰袋),保存需要-80℃

3)蛋白樣本運(yùn)輸:蛋白樣本需要經(jīng)過(guò)濃度測(cè)定,再進(jìn)行變性,變性時(shí)先加入Sample buffer,再95℃ 10 minSample buffer可防止變性導(dǎo)致的蛋白沉淀析出。變性的蛋白可直接冷藏運(yùn)輸,-20℃穩(wěn)定保存。



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