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Southern Blot原理和實驗步驟2022/03/25

SouthernBlot印跡定義：涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質轉移到載體膜上以進行檢測或鑒定的分析技術稱為印跡。變性片段從凝膠中轉移到載體膜上的過程使其易于使用探針或抗體進行分析。根據要分離的物質，印跡技術可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡，它們分別分離DNA、RNA和蛋白質。SouthernBlot是一種用于分子生物學、免疫遺傳學和其他分子方法的分析技術，用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測或鑒定感興趣的DNA。該技術由

實驗室細胞培養的儀器和實驗室耗材有哪些？2022/03/25

用于動物細胞培養的實驗室儀器設備和實驗室耗材有很多種，進行動物細胞培養所需的基本設備如下：設備有益設備有用的附加設備振蕩培養箱生物安全柜低溫冷凍柜顯微鏡細胞計數儀玻璃器皿清洗機滅菌器真空泵菌落柜臺清洗儀器二氧化碳培養箱共聚焦顯微鏡殺菌干燥箱制備和質量控制熒光激活細胞分選儀離心機溫度記錄純水機細胞生物反應器液氮罐移液器和自動移液器水浴鍋動物細胞培養實驗室所需基本設備清單：1.無菌工作區/細胞培養罩（即層流罩或生物安全柜）2.培養箱（推薦使用潮濕的二氧化碳培養箱）3.水浴4.離心機5.冰箱和冰柜(–

關于蛋白電泳中的SDS聚丙烯酰胺凝膠2022/03/24

蛋白電泳是研究蛋白質性質的一種相對簡單、快速和高靈敏度的工具。它是分析化學、生物化學和分子生物學的主要工具。通過電泳分離蛋白質是基于這樣一個事實，即帶電分子將在施加電場時通過基質遷移。蛋白質電泳分離的基質是聚丙烯酰胺。用于形成聚丙烯酰胺的化學試劑是單體丙烯酰胺和N，N'-雙丙烯酰胺（雙-丙烯酰胺）。聚合丙烯酰胺和雙丙烯酰的方法是使用TEMED（四*基乙二胺）和過硫酸銨。聚丙烯酰胺凝膠內部的聚合形成了一個交聯的微孔網絡。這種孔隙網絡允許小蛋白質分子快速通過，同時減緩較大蛋白質的遷移。這導致基于其分

紫外光譜的原理及其應用2022/03/23

紫外光譜是紫外分光光度計等分析化學中的重要工具。UV（紫外線）光譜的另一個名稱是電子光譜，因為它涉及將電子從基態提升到更高的能量或激發態。在本文中，我將解釋紫外光譜的基本原理、工作原理和所有應用。一、紫外光譜簡介紫外光譜是一種吸收光譜，其中紫外線區域（200-400nm）的光被分子吸收。紫外輻射的吸收導致電子從基態激發到更高能態。被吸收的紫外線輻射的能量等于基態和高能態之間的能量差（deltaE=hf）。通常，有利的躍遷是從MAX占據分子軌道(HOMO)到LOW未占據分子軌道(LUMO)。對于大

ISS原位測序原理和方法應用2022/03/23

原位測序(ISS)是一種新方法，通過該方法直接在固定組織或細胞樣品的切片中對mRNA進行測序。原位測序原理關鍵是測序信息與其位置之間的聯系—在一些情況下，是亞細胞位置。這與傳統測序不同，后者在將樣本從內源環境中移除后分析樣本，從而丟失位置信息。ISS由斯德哥爾摩大學開發，可同時量化數百個mRNA轉錄本，并以單細胞分辨率在空間上解析它們。該方法使用四種熒光染料來指示核酸堿基、RNA掛鎖探針和催化在掛鎖探針位置形成環化DNA的酶，這種機制稱為滾環擴增。使用成像技術讀取產生的熒光DNA?？臻g檢測技術斯

什么是生物安全柜？2022/03/17

生物安全柜是一種通風的外殼，可保護用戶、產品和環境免受因處理潛在危險微生物而產生的氣溶膠的影響。連續氣流通過HEPA過濾器排放到大氣中。三種保護狀態對柜內有害物質的個人防護避免樣品污染的產品保護。環境保護，防止機柜內的污染物。生物安全柜在處理生物制劑時根據其容納能力分為三類。1級機柜提供個人和環境保護。用于處理低到中等風險的生物制劑。生物安全等級：1、2和3類2機柜提供人員、環境和產品保護。用于處理低到中等風險的生物制劑。生物安全等級：1、2和3級3級機柜一個高度專業化的實驗室“手套箱”。3級機

RFID標簽在實驗室中的應用2022/03/15

對于依賴速度和準確性來掃描大量庫存的實驗室來說，RFID標簽代表了對大多數傳統標簽方法的巨大改進。RFID技術最初是在二戰期間構思的，已被用于各種行業，從防盜檢測和可掃描房間鑰匙到核對材料的跟蹤。實驗室中的RFID標簽在實驗室中，RFID標簽具有許多優勢，包括能夠從遠處同時跟蹤樣品，而無需直接視線。這項技術通過使用無源RFID嵌體來實現，該嵌體由嵌入在標簽中的集成電路（芯片）和天線組成，標簽發出無線電信號以響應讀取器，然后讀取器處理所有樣品的相關信息。從而可以輕松地通過這些標簽來節省時間并提高跟

實驗室移液器使用10種技巧2022/03/15

毫無疑問，移液器是生物學研究的重要的工具之一。它們有多種設計，用于無數研究領域。雖然許多液體處理指南都強調移液器維護的重要性，但移液器技巧同樣重要。下面，我們分享一些移液器的使用方法，移液操作的10種技巧，以改進您的移液技術。1.選擇合適的移液槍和吸頭：移液槍與移液器吸頭的匹配度是移液準確度的關鍵。如果吸頭和移液槍不匹配，或使用質量差的吸頭，可能會影響到吸頭和移液槍之間的密封性能。良好的移液器吸頭可確保適當的密封，從而最大限度地減少因泄漏引起的樣品損失。2.根據液體密度適當校準移液器：如果液體的

二代測序降低實驗成本方案2022/03/15

隨著成本穩步下降，二代測序NGS變逐漸增多，但如果經常使用，它仍然是一種成本昂貴的工具。其實在實驗室中，掌控好以下幾個環節也是可以節省NGS的總體成本的。這里提供一些關于降低二代測序-NGS成本的方法可供參考。1.樣品質量控制樣本的質量直接關乎到二代測成本，質量較差的樣本，會間接增加測序步驟和處理時間。所以，降低成本的簡單方法之一就是從樣品提取開始，通過部署于樣品類型和目標核酸的樣品純化方法，來確保用于下游分析的核酸純度和產量。NGS文庫制備過程中發生的酶促反應對所用樣品的數量和質量較敏感。因此

生物反應器培養中支原體污染對細胞有什么影響？2022/03/14

支原體抗體又稱Mollicutes，它是一種微小的并可以自我復制的細菌（直徑0.1–0.3µm），一般在生物反應器哺乳動物細胞培養物中很難進行檢測和去除。支原體由于缺乏細胞壁，使它們可以輕易穿過0.1µm–0.22µm的除菌過濾器或濾膜。由于支原體具有較小的基因組，難以進行選擇復制和代謝，所以，通常需要宿主細胞才能生存。某些支原體物種已引起細胞培養物的隱匿性污染，尤其是在基礎研究環境中，對細胞健康或細胞培養性能的可見變化很小。然而，支原體抗體可以通過幾種潛在機制以更微妙的方式改變培養性能和產品質

如何選擇基因測序方法2022/03/14

當今的主要技術基因測序技術相對成熟，DNA測序的主要方法有Sanger測序、下一代測序(NGS)和長讀長測序。如何選擇基因測序方法。以下是對這些方法、優缺點和重要標準的簡要回顧，可幫助您權衡下一個測序選擇。選擇測序方法的標準選擇測序方法的標準很多，取決于研究人員及其項目的性質。正在研究的生物學問題是關鍵。PacificBiosciences副總裁JonasKorlach說：“研究的背景決定了使用哪種類型的測序，因為不同的測序方法具有不同的特征來推動選擇?！背Ｒ姷臉藴拾y序時間、通量、成本和準確

吞噬細胞、巨噬細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞的區別與功能2022/03/10

吞噬細胞、巨噬細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞的區別與功能免疫細胞是生物體內所存在的一種重要細胞，它們的主要作用是參與對抗異物或清除死細胞。常見的免疫細胞可以分為以下幾種：吞噬細胞、巨噬細胞、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞三大類。它們的區別與功能分別是什么？吞噬細胞和吞噬作用當身體被傳染性病原體（例如某些微生物）破壞時，它們會遇到免疫系統的各個部分。一般來說，吞噬細胞是一個廣義的術語，指的是任何可進行吞噬作用的細胞。吞噬作用。在吞噬作用中，吞噬細胞吞噬大的原核細胞，如細菌，或真核細胞，如酵母細胞或死細胞

細胞培養自動化的優勢和流程2022/03/10

細胞培養自動化的優勢和流程涉及細胞生物學、細胞信號傳導、藥物、蛋白質表達、癌癥生物學、再生醫學、納米材料等科學領域的實驗室嚴重依賴細胞培養物的使用。已經建立了細胞培養自動化系統的方法，以執行建立、生長和維護細胞培養的過程，取代了以前大量依賴人工的系統。自動化系統可以執行曾經由實驗室技術人員負責的過程的所有關鍵部分，例如在液體中培養培養物、電鍍培養物、稀釋樣品、將培養物放入孔中等等。這些自動化方法因其能夠節省時間和資源以及提高樣品的準確性和質量而廣受歡迎。如果沒有自動化，通過細胞培養生產細胞和細胞

GFP抗體在蛋白質標記應用中的常見問題2022/03/10

GFP抗體在蛋白質標記應用中的常見問題標簽：抗體蛋白質結構科學科普GFP抗體GFP適合于蛋白質標記，這是該抗體的天然優勢。雖然它非常適合實時成像，例如，作為TP53MITE-seq屏幕的報告器，其他應用導致GFP熒光猝滅，這使得有必要使用抗GFP抗體。組織樣本的冷凍保存、組織學制備和固定劑的使用通常會導致GFP熒光*或部分喪失，因此需要使用抗GFP抗體來獲得可靠的結果。通過蛋白質印跡檢測GFP標記的蛋白質和通過免疫沉淀研究蛋白質-蛋白質相互作用也需要使用GFP抗體?？笹FP抗體可用作多克隆或單克

蛋白免疫印跡實驗常見問題原因分析匯總2022/03/09

蛋白免疫印跡實驗常見問題原因分析匯總如下：一、檢測無信號主要可能由于以下原因導致：1.用于檢測的二抗不匹配。解決辦法：需要確定一抗的宿主。2.一抗二抗的濃度過低：需要耐心地重新實驗。3.一抗不識別被檢測物種中的蛋白質：可以再檢查以下一抗的特異性。4.凝膠上上樣的蛋白量太少：凝膠上樣品過少也會導致信號弱，所以適當增加樣本量也可以防止此現象發生。5.傳輸效率相當低：出現這種情況可以嘗試修改轉移程序的操作，確保PVDF與甲醇預孵育。轉移后干燥PVDF以確保蛋白質與疏水膜的結合。6.一抗使用次數過多：億

冷凍保存技術的應用2022/02/28

冷凍保存是基于某些小分子進入細胞并防止脫水和形成細胞內冰晶的能力，在冷凍過程中會導致細胞死亡和細胞器破壞。兩種常見的冷凍保護劑是二甲基亞砜(DMSO)和甘油。甘油主要用于紅細胞的冷凍保護，DMSO用于保護大多數其他細胞和組織。一種叫糖海藻糖存在于能夠在極度脫水下存活的生物體中，用于冷凍干燥的冷凍保存方法。海藻糖穩定細胞膜，特別適用于保存、干細胞和血細胞。大多數細胞冷凍保存系統使用控速冷凍機。該冷凍系統將液氮輸送到放置細胞懸液的封閉室中。仔細監測冷凍速度有助于防止細胞快速脫水和冰晶形成。通常，將細

一抗和二抗有什么區別？2022/02/25

文章標簽:抗體抗原抗體反應一抗二抗科學科普抗體有一抗和二抗的區別，抗體也稱免疫球蛋白是免疫系統響應“外來”物質（即微生物上存在的抗原）而產生的糖蛋白。每種抗體都是不相同的，它們會與其同源抗原結合并中和感染過程中微生物產生的毒素?？贵w存在于血漿、血清、唾液和眼淚等體液中。事實上，它們約占血漿中蛋白質的20%。抗體結構抗體屬于Y形分子，它的結構主要是由3個部分所組成的。它們總共有4條鏈：即兩條輕鏈與兩條重鏈。這些鏈的特定結構和組合允許抗體分子同時與多個細胞結合。抗體分子的不同部分可以結合多種抗原，也

Vero細胞培養接種工藝技術2021/11/23

Vero細胞近年來作為新時代制藥產業的熱門細胞，成為轉基因、蛋白、抗體類制藥企業普遍使用使用的載體工具。使用細胞生物反應器進行Vero細胞的規?；鲋车慕臃N工藝如下：一、實驗前準備：細胞∶Vero細胞（ATCC級別的）、DMEM培養基(Hyclone)、新生牛血清、抗生素、除菌濾膜、CT-3微載體、2L實驗室生物反應器，5L搏旅/楚怡細胞培養生物反應器、搖瓶、細胞培養瓶、水浴鍋。二、接種實驗方法1.微載體的預處理和滅菌：接種實驗前的微載體需要用無鈣、鎂離子的PBS磷酸鹽緩沖液進行吸脹、洗滌，之后

移液器故障破解小技巧2021/09/07

移液器俗稱移液槍，是生物實驗室、醫學檢驗等機構中常用的實驗工具。主要分為兩大類手動移液器和電動移液器，電動移液器又被稱作電子移液槍。由于實驗室移液器使用頻率較高，在使用過程中或多或少會出現故障，一般情況下，移液器類常見的故障主要有以下幾個：一、移液器排液不盡，在移液器吸頭頂端會殘留少許樣品。這種情況往往是由于移液器的吸頭不匹配所造成的，如果吸頭口部過大，會降低與移液器之間的密封性，從而減小內部壓強，容易出現吸頭脫落、殘液、吸液不準等現象。目前市場上有些移液器廠商生產移液器的同時也具備移液器吸頭的

移液器不準怎么辦？別慌！阿爾法售后教你如何校準移液器2021/01/28

移液器校準維護與保養近期有很多同學反應，實驗數據結果總是與試劑偏差較大。在排除了實驗方法，操作誤差的原因外，有個重要的細節容易被忽略，那就是移液器的準確度。根據CMA計量認證和CNAS機構提供的相關標準，移液器的檢定周期為一年。而有的實驗室為節約成本，一把移液器甚至使用2~3年都不進行校準與維護。這樣，移液器會因污垢堆積、組件老化、彈簧失靈等原因發生故障，不僅大大影響實驗的準確度也會大大縮減移液器的使用壽命。那么移液器我們可以自己校準和維護嗎？當然可以。移液器的保養維護一般分為外部清洗和內部清潔