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2022
05-11

常用的培養基耗材和細胞接種量
我們常用的細胞培養容器有T25培養瓶、10cm培養皿、多孔板等，尤其是是多孔板，需要加多少培養基，很多同學不太確定，下面小編為大家整理了常見的培養容器的加液體積和建議接種量：耗材名稱規格培養面積(cm^2)加液體積（ml）建議接種量(×10^6）T25培養瓶底面積25cm^22551.25T75培養瓶底面積75cm^27515~303.75T175培養瓶底面積175cm^217535~408.756cm培養皿直徑6cm21.251.0610cm培養皿直徑10cm60.88~103.0415cm培
2022
05-09

大鼠骨髓間充質干細胞該如何保存和應用？
大鼠骨髓間充質干細胞是哺乳動物骨髓基質中發現的一種細胞亞群，具有多種分化潛能，可分化為骨、軟骨、脂肪、神經和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。在骨髓間充質細胞的原代培養過程中，可在約24小時內發生貼壁生長。細胞呈圓形、梭形和三角形，生長緩慢。液體交換后細胞增殖明顯，呈梭形為主，形態多樣。70%-80%可在10-14天融合，達到通過標準。傳代細胞形狀單一，有紡錘形或扁平形，增殖至細胞融合
2022
05-07

普諾賽4月直播答疑：常見細胞污染類型及解決方法
在4月28日開播的“常見細胞污染類型及解決方法”課程中，有很多老師就細胞污染提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細解答。01Q：在細胞培養液中，有種可以游動的蟲子是什么污染？A：是細菌污染。帶鞭毛的細菌就是會游動的。02Q：有很多黑點，在原位顫抖，沒那么明顯的定向運動，是什么污染？A：細胞碎片、血清沉淀和有些細菌污染，都會在原位顫抖。前者是原地做不規律的布朗運動，細菌是原地轉動，頻率會高很多。03Q：血清的絮狀物雜質屬于正常現象嗎？A：血清里面有一些大分子蛋白和一些纖維析出，呈現絮狀，
2022
04-29

SH-SY5Y收貨常見問題及解決方案
常溫運輸過程中，細胞不免受到震蕩和溫度變化的影響，出現皺縮、聚團甚至脫落的現象。遇到這種情況，不用緊張，只要正確處理，細胞就能恢復正常生長。收貨時皺縮常溫細胞收貨后，把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時即可。如果4小時后細胞仍然沒有鋪展開，密度適中的前提下可以靜置過夜（過夜前倒出部分培養基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松）。收貨時聚團常溫細胞收貨后，先把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時以穩定狀態，再進行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。收貨時脫落常溫細胞收貨后，先把細
2022
04-24

細胞培養中常見細胞污染類型及預防辦法
凡混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染，細胞污染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞污染類型及處理方法。常見污染類型細菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態規則，分布均勻；增殖速度快，一般污染后48~72小時爆發式增殖；營養消耗快，培養基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。處理方法：輕度污染可用10X雙抗清洗處理，重度污染建議消殺后丟棄。真菌污染特征：呈鏈球狀或絲狀。常形成肉眼可
2022
04-22

大鼠海馬神經元細胞培養和傳代流程
體外培養大鼠海馬神經元細胞細胞周期有限；建議使用與procell配套的專用生長培養基和正確的操作方法進行培養，以保證細胞處于理想培養狀態。procell實驗室分離的大鼠海馬神經元細胞采用胰蛋白酶消化、神經元特異性培養基培養、篩選結合化學試劑抑制制備。細胞總數約為5×105個細胞/瓶。大鼠海馬神經元細胞培養和傳代流程（請嚴格按照無菌操作）：1、從原培養瓶中吸出培養基，用PBS緩沖液潤濕細胞兩次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細胞（注意消化時間，一般控制在1-2min內）；2、在顯微鏡下觀察消化
2022
04-21

收到293 [HEK-293]細胞后如何操作？
293[HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293[HEK-293]細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出，293[HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA，但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋
2022
04-14

直播答疑 | 普諾賽3月直播：細胞系由來及鑒定問題
在普諾賽3月30日開播的細胞培養直播課堂中，有很多同學提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，并作了詳細解答。01動物細胞怎么鑒定？要根據實驗的目的以及細胞類型進行選擇。如果是人源細胞系，并且有文獻或數據庫公布對應細胞信息，則進行STR鑒定即可；如果使非人源的細胞系，可以進行種屬鑒定，并且附加一個研究方向相關的指標進行驗證，部分小鼠細胞也可以做STR鑒定，但目前數據庫不*，很多都沒有匹配數據。對于原代細胞，如果能夠確保取材無誤，僅進行特異性指標方面的檢測就可以了，方法可采用免疫熒光、流式檢測、
2022
04-12

胎牛血清的儲存和使用都是有講究的
胎牛血清是實驗室常用的天然培養基，但不能直接使用。無論是存儲還是使用，都比較復雜。血清的常規處理是熱鈍化，即置于56°水浴中30分鐘；其目的是使血清中的補體成分和一些未知的細胞生長抑制分子失活。實驗表明，大多數細胞不需要經過正確處理后的熱滅活血清。經過這樣的處理，血清只能輕微促進細胞的生長，或者根本沒有作用。即使是高溫處理通常也會影響血清的質量并降低細胞的生長速度。熱處理過的血清會顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時，這些沉淀物，如“小黑點”，常常使研究人員誤認為血清被污染了，而將血清置于
2022
04-07

雞卵泡顆粒細胞分離、培養實驗步驟
雞卵泡顆粒細胞分離、培養實驗步驟：A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液處死母雞，新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min，打開腹腔，剪取整個卵巢，小心剝離卵泡(以8-15g為最佳)，置于裝有PBS緩沖液的無菌培養皿中；B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污，漂洗3次；將漂洗干凈的卵泡移入裝有預冷PBS緩沖液的平皿中，剝凈卵泡外膜、結締組織及血管網；C.用手術刀在卵泡表面劃一道1-2cm長的切口(動作要快)，釋放卵黃，用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈，剩下的卵泡膜即為：基膜和卵泡顆粒
2022
04-06

大鼠骨髓間充質干細胞的分離方法主要有這兩種
大鼠骨髓間充質干細胞是在哺乳動物骨髓基質中發現的細胞亞群，具有多種分化潛能，可分化成骨、軟骨、脂肪、神經和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據干細胞在低血清培養基中的優勢特性，定期更換溶液去除非貼壁細胞，從而達到純化和擴增MSC的目的。密度梯度離心是根據骨髓中各細胞成分的不同比例，分離出單核細胞進行貼壁培養，兩者本質上沒有
2022
03-31

3月高分文獻精選：普諾賽助力各類疾病研究
截止至2022年3月，使用普諾賽產品發表的文獻，總發表篇數達3000+，單篇最高影響因子達39.849。本期我們精選5篇影響因子在15分以上的文獻，進行分享。其中，使用普諾賽產品MC3T3-E1細胞和HOS細胞發表于知-名期刊MaterialsToday的文章，單篇影響因子高達31.041。正是因為越來越多研究團隊的選擇，我們對產品質量從未松懈，期待為您帶來更好的體驗！高分文獻精選01用于骨肉瘤臨床治療和組織再生的新型光熱控制多功能支架Anovelphotothermallycontrolled
2022
03-28

大鼠海馬神經元細胞的使用需要特別注意這些
從海馬體中分離出大鼠海馬神經元細胞；海馬體又稱海馬回、海馬區和大腦海馬體，主要負責記憶和學習。海馬神經元是海馬體中的主要細胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內臟功能的調節。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統，在神經系統疾病的學習、記憶、情緒反應和病理生理變化中起重要作用。此外，海馬體是中樞神經系統中神經干細胞的主要聚集區。它具有高度有序的層狀結構和神經元分布相對獨立的特點。邊界比較清晰，材料容易獲取。因此，海馬神經元體外培養模型被基礎醫學和臨床醫學研究人
2022
03-23

收到THP-1細胞后如何操作？
THP-1細胞對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用，無表面和胞質免疫球蛋白。THP-1細胞可以用佛波醇、TPA誘導單核細胞分化。1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請及時與Procell技術支持聯系。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養，隔天再取出進行觀察。3.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。4.可將培養瓶內多余的培養基轉移
2022
03-21

RAW 264.7收貨后如何操作？
RAW264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW264.7細胞不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。RAW264.7細胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖，并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導RAW264.7細胞分解紅血球，但對腫瘤靶細胞無作用。1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請及時與Procell技術支持聯系。
2022
03-15

收到大鼠骨髓間充質干細胞后如何操作？
大鼠骨髓間充質干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多
2022
03-14

拿到雞卵泡顆粒細胞應執行以下操作
雞卵泡顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞，它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動，如卵泡的生長起始、發育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌，細胞呈圓形或橢圓形。細胞總數約5×105個/瓶，細胞純度高達80%以上，不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細胞；成熟卵泡是卵巢的結構成分之一。卵泡腔大，卵丘明顯。卵泡的子宮內膜細胞靠近卵泡的顆粒層，它們之間有基底膜。子宮內膜細胞呈多角形，胞質清晰，核圓形。細胞間可見許多毛細血管。外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周
2022
03-03

小鼠單核巨噬細胞都有哪些作用？
小鼠單核巨噬細胞細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-,Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用。小鼠單核巨噬細胞具有較廣泛的造血活性，可刺激中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細胞減少。用于異體或自體骨髓移植，加速骨髓功能恢復，亦用
2022
03-03

收到細胞后如何操作？
1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請及時與Procell技術支持聯系。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養，隔天再取出進行觀察。3.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。4.可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞傳代時，可以將該培養基按照一定比例和客戶自備的培養基混合使用，讓細胞逐漸適應培養條件。5.
2022
02-21

幾種常見的細胞污染類型及處理方法
凡混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為細胞污染，細胞污染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞污染類型及處理方法。常見細胞污染類型細胞細菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態規則，分布均勻；增殖速度快，一般細菌污染后48~72小時爆發式增殖；營養消耗快，培養基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。處理方法：輕度細菌污染可用10X雙抗清洗處理，重度細菌污染建議消殺后丟棄。細胞真菌污染特征：

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