Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓間充質干細胞系
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- 更新時間 2025/7/23 15:27:36
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Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓間充質干細胞系
Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓間充質干細胞系作為從 SD 大鼠骨髓中分離純化的成體干細胞模型，因具有穩定的增殖能力和多譜系分化潛能，在干細胞基礎研究及臨床前轉化應用中占據重要地位，成為探究間充質干細胞功能調控及組織再生機制的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自 SD 大鼠股骨與脛骨骨髓腔，經全骨髓貼壁法結合差速傳代純化建立。原代培養 24 小時可見少量細胞貼壁，48 小時后貼壁細胞伸展為長梭形，呈典型成纖維細胞樣形態，胞體均勻，突起細長，細胞核呈卵圓形，核質比適中。生長方式為貼壁生長，呈放射狀或柵欄狀排列，傳代后 24 小時貼壁率達 92%。核心參數表現出間充質干細胞特征：倍增時間約 52 小時，連續傳代 35 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數 42 條）；表面標志物譜du特，CD29、CD90 免疫熒光陽性率分別為 97% 和 95%，造血細胞標志物 CD34、CD45 表達陰性（陽性率 < 2%）；體外連續培養 50 天仍維持干細胞表型，無明顯衰老跡象；無微生物污染，細胞純度達 96%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在多向分化研究中，SD 大鼠骨髓間充質干細胞展現出優異的分化潛能。成骨誘導 14 天后，堿性磷酸酶活性較對照組升高 7.5 倍，茜素紅染色顯示大量礦化結節形成，骨橋蛋白 mRNA 表達量增加 9 倍；成脂誘導 12 天后，油紅 O 染色陽性細胞率達 68%，脂聯素分泌量增加 11 倍，可wan美模擬間充質干細胞向骨和脂肪細胞的分化過程，為干細胞命運決定機制研究提供理想模型。
組織修復研究方面，該細胞在炎癥因子刺激下，白細胞介素 - 10（IL-10）分泌量增加 4.2 倍，腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）抑制率達 58%，可通過免疫調節促進組織修復。在大鼠肝纖維化模型中，輸注該細胞 4 周后，肝纖維化程度減輕 45%，白蛋白水平提升 32%；在皮膚缺損修復實驗中，可加速創面愈合，上皮化率提高 38%，體現了其在多組織修復中的應用潛力。
藥物篩選領域，該細胞對成骨誘導劑反應敏感，經地塞mi松處理后，Runx2 轉錄因子活性增強 6 倍，成骨分化效率提升 50%，適用于骨質shu松治療藥物的活性評估。此外，通過基因修飾該細胞可高效表達治療性蛋白，在脊髓損傷模型中，分泌神經營養因子的工程化細胞可促進軸突再生，運動功能評分提高 40%，為細胞治療研究提供新策略。
培養與保存規范：推薦使用含 15% 胎牛血清的 α-MEM 培養基，添加 5ng/ml 堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 3 天更換一次，換液時保留 50% 舊培養基以維持細胞因子微環境。
傳代時，當細胞融合度達 70%-80% 時進行操作，用 PBS 輕柔沖洗 2 次，加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 4 分鐘，待細胞邊緣收縮后加入含血清培養基終止消化，傳代比例 1:4-1:6，每 4-5 天傳代一次，避免過度融合導致分化。
凍存采用 90% 胎牛血清 + 10% DMSO 的凍存液，細胞濃度調整為 2×10?個 /ml，經程序降溫（-1℃/min）至 - 80℃，24 小時后轉入液氮保存，復蘇存活率達 88% 以上，3 代后可wan全恢復分化潛能。運輸采用干冰冷凍運輸或活細胞專用運輸盒，收到細胞后需靜置培養 12 小時再換液，確保細胞狀態穩定。該細胞系僅限科研使用，操作需符合干細胞研究倫理規范。
SD 大鼠骨髓間充質干細胞以其穩定的生物學特性、高效的分化能力及良好的動物模型兼容性，在再生醫學研究中具有不可替代的價值，為干細胞臨床轉化研究提供了可靠的實驗平臺。
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