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BY-1263 RNSK/HL-010|大鼠正常皮膚角質細胞系

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RNSK/HL-010|大鼠正常皮膚角質細胞系
RNSK/HL-010|大鼠正常皮膚角質細胞系作為源自大鼠表皮基底層的正常角質形成細胞模型,因保留皮膚角質細胞的增殖分化特性及屏障構建功能,在皮膚屏障功能、創傷修復機制及皮膚病病理研究中具有重要價值,成為探究皮膚表皮生理功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠背部皮膚表皮組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈多邊形,部分呈梭形,胞體大小均勻(直徑約 14-18μm),胞質呈嗜酸性,可見角質顆粒,約 15% 細胞呈現扁平狀分化特征,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁小而清晰。生長方式為貼壁生長,呈單層魚鱗狀排列,具有明顯的接觸抑制現象,傳代后 24 小時貼壁率達 92%。核心參數表現出正常皮膚角質細胞特征:倍增時間約 65 小時,連續傳代 14 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,細胞角蛋白 10(CK10)陽性率達 95%,角質細胞分化標志物 involucrin 陽性率 88%,整合素 β1 陽性率 93%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;可合成角質形成細胞特異性蛋白絲聚蛋白,基礎表達量達 40ng/mL,在鈣濃度升高時表達量增加 2.8 倍;能形成多層上皮結構,分化 3 周后可出現明顯的角質層;無微生物污染,細胞純度達 96%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在皮膚屏障功能研究中,RNSK/HL-010 細胞經十二烷基硫酸鈉(SDS)處理 24 小時后,絲聚蛋白表達量下降 45%,跨上皮電阻值降低 50%,經皮水分流失率增加 60%,可模擬化學刺激導致的皮膚屏障損傷過程,為解析皮膚屏障破壞機制提供理想模型。
在創傷修復研究方面,該細胞經血小板衍生生長因子(PDGF)處理 48 小時后,遷移速率增加 55%,增殖活性提升 48%,基質金屬蛋白酶 - 2(MMP-2)活性增強 3.2 倍,可模擬皮膚創傷后的角質細胞遷移修復過程,適用于探究創傷愈合機制及評估促修復藥物療效。
皮膚病研究領域,該細胞經腫瘤壞死因子 -α(TNF-α)處理后,炎癥因子 IL-6 分泌量增加 4.3 倍,趨化因子 CXCL8 表達量提升 3.8 倍,角質形成細胞凋亡率增加 30%,能很好地模擬銀屑病中角質細胞的異常活化狀態,為篩選皮膚病治療靶點提供實驗基礎。此外,該細胞與成纖維細胞共培養時,成纖維細胞的 Ⅰ 型膠原蛋白分泌量增加 2.5 倍,可用于探究表皮 - 真皮相互作用在皮膚穩態維持中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 Keratinocyte Growth Medium 2 培養基,添加 0.1ng/mL 表皮生長因子(EGF)、0.4mM 氯化鈣及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,以維持細胞的增殖分化平衡。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用細胞解離液,37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:3-1:4,每 5-6 天傳代一次,避免過度傳代導致分化能力下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 3×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 85% 以上,2-3 代內可恢復正常的生長和分化功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁調整培養環境鈣濃度,以防影響細胞分化狀態。
RNSK/HL-010 大鼠正常皮膚角質細胞系以其穩定的增殖分化特性、完整的皮膚屏障構建能力及典型的表皮細胞功能,在皮膚生物學研究與皮膚病機制探索中發揮著重要作用,為揭示皮膚疾病的發病機制和開發新型治療藥物提供了可靠的細胞模型。

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