該技術是一種鑒定5hmC的方法。DNA脫氨酶APOBEC3A(A3A)能夠特異地脫去C及5mC的氨基使其變為U，而5hmC則因為不被該酶識別，測序時仍被識別為C。該技術利用該酶的這種特性，特異性地檢測基因組上發生的5hmC修飾。ACE-seq原理示意如下：

（1）利用β-葡糖基轉移酶（βGT）將5hmC加上葡糖基，轉變成5ghmC，5ghmC不會被A3A酶脫氨基。

（2）利用A3A酶特異去除C和5mC的氨基，使其轉變成U，而5hmC保持為C，從而將5hmC和C/5mC區分開來。

技術優勢：

1、檢測范圍為全基因組；

2、單堿基分辨率；

3、起始DNA量比常規的oxBS技術降低100倍；

4、高準確性。

信息分析：

技術參數：

研究案例：

開發了ACE-Seq技術并利用ACE-Seq探究小鼠腦部神經細胞5mC及5hmC的特征及作用

Nondestructive, base-resolution sequencing of 5-hydroxymethylcytosine using a DNA deaminase

1、背景：

傳統的鑒定5hmC的技術需要運用化學試劑進行轉化，會破壞基因組DNA，且需要的DNA起始量較大。建立一種非破壞性的、低起始DNA量的鑒定5hmC的技術有助于加快加深5hmC的研究。

2、方法：

利用DNA脫氨酶APOBEC3A(A3A)特異性脫去C及5mC的氨基使其轉變成U的特性，建立了一種新型的鑒定基因組上的5hmC修飾的技術，并將該技術結合BS-Seq技術，研究了小鼠腦部神經細胞5mC及5hmC的特征及作用。

3、結論：

分析了小鼠腦部神經細胞5mC及5hmC在不同基因元件的水平；

探究了小鼠腦部神經細胞5mC及5hmC的異質性。

探究了5mC及5hmC在小鼠腦部神經細胞中的作用。