產品名稱：InspireSpark MJ5460 基因編輯試劑盒 國產
產品貨號：MJ5460
產品規(guī)格：50 rxn（含Solution I 75μL，Solution II 2.5mL）
儲存條件：-80℃（長期），-20℃（解凍后）

技術參數(shù)：RNP復合物自遞送系統(tǒng)，支持2000-4000 bp片段敲入

紅榮微再 MJ5460 基因編輯試劑盒 價格優(yōu)勢（Inspire Spark® PrimeRNP Kit）華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應，歡迎咨詢

產品概述

Inspire Spark® PrimeRNP Kit 是專為攻克原代細胞基因編輯瓶頸設計的革命性工具。基于自遞送CRISPR/SpCas9系統(tǒng)，無需電轉儀即可在 人原代T細胞、干細胞及難轉染細胞系 中實現(xiàn)85-90%的敲除（KO）/敲入（KI）效率， 解決傳統(tǒng)方法毒性高、效率低的難題。

核心優(yōu)勢：三大技術突破

1. 終結電轉依賴，解鎖原代細胞極限
   傳統(tǒng)電轉導致原代細胞死亡率>40%，而 Inspire Spark® 通過 eSpCas9-SgRNA自組裝復合物（37℃ 5分鐘成核），直接穿透細胞膜。實驗驗證：人原代T細胞轉導后存活率>95%，編輯效率穩(wěn)定達 88.2±3.1%（n=15）。

2. 雙高特性：高效率+低脫靶
   對比野生型Cas9， Solution I中優(yōu)化的eSpCas9蛋白 通過帶正電荷結構域增強靶向性，脫靶率降低 4.2倍（全基因組測序驗證）。支持多基因同步編輯（≤4基因），KO/KI雙功能效率>85%。

3. AAV輔助大片段敲入標準化
   兼容 AAV donor載體（MOI 2×10?-5×10?），實現(xiàn)2000-4000 bp定點整合，KI效率 50-80%。案例：TRAC位點CAR構建成功率78.3%，遠超慢病毒方案（<35%）。

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實驗流程（以人原代T細胞為例）

一、轉導復合物制備

混合1.5μL SgRNA（100μM） + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分鐘（形成RNP）。

加50μL Solution II（室溫預平衡） → 混勻后室溫靜置5分鐘。

二、細胞轉導

細胞預處理：激活T細胞48小時后洗滌，離心去培養(yǎng)基（用OptiMEM/PBS清洗殘留）。

細胞沉淀重懸于轉導復合物 → 37℃孵育45分鐘。

三、培養(yǎng)與檢測

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T細胞培養(yǎng)基 → 接種至24孔板（密度2-3×10?/mL）。

培養(yǎng)4-5天后檢測編輯效率。

關鍵注意事項

應用場景 操作要點

AAV輔助KI AAV體積≤5μL：RNP制備階段加入；>5μL：細胞培養(yǎng)階段加入（MOI: 2×10?-5×10?）

多基因編輯 方案A：混合多靶點RNP；方案B：分步轉導（間隔48小時，≤2基因/次）

細胞狀態(tài) 轉導前活性>90%

電轉兼容性 Solution I（eSpCas9）可單獨用于電轉 → 效率較野生型提升30%

產品名稱：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因編輯試劑盒）

貨號：MJ5460

規(guī)格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因編輯試劑盒，華雅思創(chuàng)現(xiàn)貨供應，歡迎咨詢

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InspireSpark® PrimeRNP Kit Q&A

Q：T細胞激活48小時后離心清洗的清洗液及鋪板培養(yǎng)基要求？

A：清洗液為實驗原用的T細胞培養(yǎng)基。操作流程：輕柔吹吸重懸細胞 → 離心（400 ×g, 5

min）→ 徹·底棄上清 → 用新鮮配制的同款T細胞培養(yǎng)基重懸細胞。目的：防止T細胞過度激

活、去除碎片、優(yōu)化細胞狀態(tài)。

Q：實驗步驟中FBS能否替換為其他添加劑？

A：可使用人AB血清或無血清培養(yǎng)基（注：無血清條件下細胞生長狀態(tài)可能減弱）。

Q：轉導培養(yǎng)基含IL-2或血清替代物是否影響轉導？

A：無影響。通過離心清洗徹·底棄除上清（避免血清蛋白干擾），最終使用轉導復合物重懸

細胞沉淀即可。

Q：同時編輯兩個基因是否需要配置兩份混合液？能否同時加入細胞？

A：僅需將RNP1與RNP2加入同一份Solution II中孵育，無需分裝多份Solution II。混合后的

復合物可同時加入細胞。

Q：敲除（KO）和敲入（KI）能否同時實現(xiàn)？最多支持幾個基因編輯？

A：支持同步操作。多基因編輯需在制備轉導復合物時進行多RNP制備，或分次轉導（建議

：首·次轉導≤2個基因，間隔48小時后再轉導≤2個基因）。

Q：Solution II能否搭配其他廠家的Cas9蛋白？是否支持電轉

A：可以使用，但未經大量數(shù)據(jù)驗證，無法保證其編輯效率。

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