SDS-PAGE和HPLC：哪種方法更適合你的蛋白純度評估？檢測技術服務詳情介紹

在蛋白組學研究與生物制藥開發中，蛋白純度評估是確保實驗可重復性和產品質量的核心環節。SDS-PAGE（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）與HPLC（高效液相色譜）是兩種常用且互補的分析方法，各具優勢與局限。本文聚焦于它們在蛋白純度分析中的適用場景、核心技術特點及優缺點，助力科研人員研發決策。

一、SDS-PAGE：基于分子量的電泳分離

SDS-PAGE利用SDS賦予蛋白相似的負電荷密度，使其在凝膠中按分子量分離，呈現清晰條帶。該技術具有以下特點：

• 操作簡便，適用廣泛：無需復雜前處理，適合多種蛋白樣品。

• 結果直觀，便于初篩：通過Coomassie藍或銀染顯色，快速判斷純度及主要雜質。

• 成本低廉，設備要求低：適用于實驗室日常檢測及小規模樣品分析。

然而，SDS-PAGE存在分辨率有限的問題，尤其在蛋白分子量相近或豐度懸殊的樣品中。此外，其定量能力受限，染色效率和上樣量均可能影響結果準確性。對于需高精度定量和低豐度雜質分析的應用，SDS-PAGE往往不足以勝任。

二、HPLC：基于理化性質的高分辨分離

HPLC依靠固定相與流動相的相互作用，實現蛋白混合物的高效分離。關鍵優勢包括：

• 分辨率與靈敏度優異：可區分分子量相近或結構相似的蛋白，適應復雜生物樣品。

• 高精度定量：結合紫外、熒光或質譜檢測，實現蛋白組分的準確量化。

• 方法可擴展：通過優化色譜條件（如反相、離子交換、尺寸排阻），適應不同類型蛋白及分析需求。

HPLC的缺點主要包括對樣品處理和儀器維護的嚴格要求，以及高成本投入。此外，某些蛋白在高壓和有機溶劑環境下可能變性或丟失活性，需要針對性優化方案。

三、技術比較：根據需求選擇zuìjiā方案

在蛋白純度分析中，選擇SDS-PAGE還是HPLC需綜合考慮樣品復雜度、分析目的及精度要求：

• 科研初步篩選：當目標是快速評估純度或優化表達條件，SDS-PAGE因其簡單、直觀而優勢明顯。

• 高標準純度檢測：在生物制藥質量控制、蛋白藥研發及申報階段，HPLC以其高分辨率和定量能力，成為bùkěhuòquē的選擇。

• 聯合應用策略：在實際應用中，SDS-PAGE與HPLC往往協同使用。先通過SDS-PAGE進行粗略篩選，再以HPLC確認純度和雜質成分，為實驗設計和產品質量提供多維度數據支持。

蛋白純度不僅關乎實驗可重復性，更直接影響產品安全性與有效性。選擇合適的純度評估方法，不僅取決于樣品復雜度與分析需求，也離不開zhuānyè技術平臺的支撐。百泰派克生物科技致力于提供高質量的蛋白分析服務，依托優良的液相色譜系統與高分辨質譜平臺，我們不僅能夠實現復雜蛋白樣品的高精度分離與定量，還可根據客戶需求定制個性化分析方案。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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