蛋白純度分析技術(shù)優(yōu)缺點對比檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

蛋白純度是生物制藥、dànbáizhì組學及基礎(chǔ)生命科學研究中的核心質(zhì)量指標。伴隨生物制品開發(fā)與蛋白藥物上市的加速推進，蛋白純度分析技術(shù)也不斷演進。目前，常用的分析技術(shù)包括SDS-PAGE、液相色譜（RP-HPLC與SEC）、毛細管電泳（CE）、質(zhì)譜（MS）和紫外-可見光光譜（UV-Vis）。

一、SDS-PAGE

SDS-PAGE是經(jīng)典的電泳方法，利用蛋白在聚丙烯酰胺凝膠中根據(jù)分子質(zhì)量遷移的特性實現(xiàn)分離，廣泛應用于蛋白純度的初步評估。

1、優(yōu)點

SDS-PAGE具有操作簡便、成本低廉、檢測結(jié)果直觀的優(yōu)勢。其染色靈敏度高，能夠檢測到納克級別的蛋白，即使在樣品量有限的條件下也能獲得可靠結(jié)果。由于其結(jié)果直觀，科研人員能夠快速初步判斷蛋白樣品是否含有雜質(zhì)。此外，SDS-PAGE的普及度高，實驗室基礎(chǔ)設(shè)備即可勝任，適合大多數(shù)實驗室初步篩查使用。

2、缺點

SDS-PAGE也存在局限。其分辨率有限，難以分離分子量相近的蛋白，特別是對復雜樣品中的微小雜質(zhì)識別能力不足。此外，染色和脫色步驟復雜，易引入人為誤差，導致半定量結(jié)果偏差。該方法對不同樣品的適應性不強，對于需要高靈敏度和高分辨率檢測的研究或生產(chǎn)過程，其能力明顯不足。

二、液相色譜（RP-HPLC與SEC）

液相色譜技術(shù)（包括反相高效液相色譜和尺寸排阻色譜）在蛋白純度分析中已成為主流方法之一。RP-HPLC利用疏水作用力分離蛋白，SEC則基于分子大小進行分離。

1、優(yōu)點

液相色譜具有高分辨率和良好的定量能力，適合復雜樣品的分析。RP-HPLC尤其適合疏水性蛋白和多肽，檢測靈敏度高，可實現(xiàn)微克級別蛋白的分離檢測。SEC則能評估蛋白聚集和單體狀態(tài)，是質(zhì)量控制中的重要手段。此外，液相色譜儀器自動化程度高，支持高通量分析，可顯著提升實驗效率和結(jié)果重現(xiàn)性。該方法還能夠與多種檢測器聯(lián)用（如質(zhì)譜），為后續(xù)深入分析奠定基礎(chǔ)。

2、缺點

液相色譜設(shè)備昂貴，維護和操作復雜，且樣品前處理要求嚴格。RP-HPLC采用高有機溶劑可能導致蛋白結(jié)構(gòu)破壞，從而影響功能和純度評估；SEC分辨率相對較低，對于分子量接近的蛋白分離效果不理想。此外，該技術(shù)對操作人員的技能要求較高，需要合理設(shè)計梯度和流速，優(yōu)化分離條件，以獲得理想結(jié)果。

三、毛細管電泳（CE）

毛細管電泳以其高分辨率和自動化程度著稱，近年來在蛋白純度分析中的應用逐漸增多，特別是在生物制藥領(lǐng)域。

1、優(yōu)點

CE具有jígāo分辨率，能夠區(qū)分電荷、大小或構(gòu)象不同的蛋白，適合復雜混合物的分離分析。其樣品消耗量極低，適合痕量樣品分析，且分析速度快，有利于提高實驗室工作效率。自動化平臺可以減少人為誤差，提高數(shù)據(jù)一致性與可重復性。此外，該技術(shù)對檢測限要求高、檢測范圍寬，特別適合需要高靈敏度與精密度的蛋白純度檢測。

2、缺點

CE技術(shù)對樣品緩沖體系和條件的敏感性較高，實驗前需進行嚴格優(yōu)化以確保分離效果。部分蛋白可能因構(gòu)象或電荷特性差異導致分離困難。盡管自動化程度高，但設(shè)備價格較高，對實驗室環(huán)境和操作人員培訓有較高要求。此外，CE方法在大規(guī)模樣品處理上的通量和適應性相較液相色譜有限。

四、質(zhì)譜（MS）

質(zhì)譜技術(shù)是生命科學研究中dànbáizhì定性和定量分析的核心工具之一，尤其在復雜樣品的蛋白純度與結(jié)構(gòu)表征中展現(xiàn)出dútè優(yōu)勢。

1、優(yōu)點

質(zhì)譜具有jígāo的靈敏度和分辨率，能夠檢測到極低豐度的蛋白雜質(zhì)，并提供詳細的分子質(zhì)量、翻譯后修飾和異構(gòu)體信息。通過與液相色譜聯(lián)用（LC-MS），可在復雜樣品中實現(xiàn)高效分離與高精度定量，適合對目標蛋白進行深入解析。此外，質(zhì)譜能夠揭示蛋白結(jié)構(gòu)信息，如肽段序列、糖基化位點和氧化修飾等，為蛋白藥物開發(fā)和質(zhì)量控制提供強大支持。

2、缺點

質(zhì)譜分析對樣品前處理和儀器維護要求jígāo，且數(shù)據(jù)分析需依賴復雜的軟件和經(jīng)驗豐富的分析師。設(shè)備投資成本高，維護費用和運行成本亦不容小覷。質(zhì)譜分析通常需要與液相色譜等技術(shù)結(jié)合，增加了整體流程的復雜度和耗時。此外，不適合作為快速篩查手段，僅適用于對dànbáizhì純度和結(jié)構(gòu)有深入需求的應用場景。

五、紫外-可見光光譜（UV-Vis）

UV-Vis技術(shù)因其簡單、快捷，常被用于蛋白定量及粗略純度評估，在實驗室日常檢測中依然占據(jù)一席之地。

1、優(yōu)點

該方法快速、經(jīng)濟，無需復雜樣品制備，可直接測量蛋白在280nm處的吸光值，估算蛋白濃度和初步純度。設(shè)備普及度高，適用于大量樣品的初篩。對科研人員而言，UV-Vis幾乎無需zhuānyè培訓，即可完成蛋白初步檢測，便于后續(xù)實驗安排。

2、缺點

UV-Vis對目標蛋白和雜質(zhì)的區(qū)分能力差，檢測結(jié)果往往為間接推測。若樣品中含有核酸或其他共吸光物質(zhì)，結(jié)果會出現(xiàn)顯著偏差。此外，該技術(shù)靈敏度和特異性均較低，無法滿足對高純度要求的實驗與質(zhì)量控制，尤其在復雜混合樣品中，其局限性尤為突出。

蛋白純度分析技術(shù)多樣，各有側(cè)重。實際應用中需結(jié)合樣品類型、研究目標、分析需求與預算綜合選擇。SDS-PAGE適合初步篩查，液相色譜和毛細管電泳可滿足高分辨率和定量需求，質(zhì)譜適合深入解析和復雜樣品分析，UV-Vis則適用于快速初篩。科研與工業(yè)界常將多種技術(shù)結(jié)合使用，以獲得全面、準確的蛋白純度評估結(jié)果。在生物醫(yī)藥和蛋白組學研究飛速發(fā)展的jīntiān，百泰派克生物科技持續(xù)關(guān)注dànbáizhì分析技術(shù)的zuì新進展，致力于為科研人員和企業(yè)提供高質(zhì)量、zhuānyè化的HPLC測定蛋白純度服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、bǎxiàngdàn白zhìzǔxué、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務(wù)可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

蛋白純度分析技術(shù)優(yōu)缺點對比檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹