上海喆圖科學儀器有限公司
二氧化碳恒溫搖床動態培養體系下藥物誘導免疫細胞凋亡的研究
檢測樣品：免疫細胞
檢測項目：/
方案概述：本研究利用二氧化碳恒溫搖床建立動態細胞培養模型，探討藥物對T淋巴細胞凋亡的影響。通過調節搖床轉速（80-120 rpm）模擬體內流體微環境，結合恒溫（37℃）、恒濕及5% CO?條件，對比靜態培養體系，分析動態培養對藥物誘導凋亡效率的作用。結果顯示：動態培養顯著提升細胞凋亡均一性（p<0.01），120 rpm組早期凋亡率較靜態培養提高。證明二氧化碳恒溫搖床可優化免疫細胞藥物敏感性研...
一、摘要
本研究利用二氧化碳恒溫搖床建立動態細胞培養模型，探討藥物Staurosporine對Jurkat T淋巴細胞凋亡的影響。通過調節搖床轉速（80-120 rpm）模擬體內流體微環境，結合恒溫（37℃）、恒濕及5% CO?條件，對比靜態培養體系，分析動態培養對藥物誘導凋亡效率的作用。結果顯示：動態培養顯著提升細胞凋亡均一性（p<0.01），120 rpm組早期凋亡率（32.7±2.1%）較靜態培養（24.3±3.5%）提高34.6%。證明二氧化碳恒溫搖床可優化免疫細胞藥物敏感性研究模型。
二、引言
細胞凋亡在免疫調節及抗腫瘤藥物研發中具核心地位。傳統靜態培養存在氣體交換不均、代謝廢物累積等問題，影響藥物反應真實性。二氧化碳恒溫搖床通過三維振蕩促進營養/氣體擴散，模擬生理微環境流速（50-200 μm/s），為免疫細胞-藥物互作研究提供理想平臺。本研究以人源Jurkat T細胞為模型，探索動態培養對藥物誘導凋亡的影響機制。
三、材料與方法
設備
二氧化碳恒溫搖床（Eppendorf CO? Shaker Incubator）
細胞與藥物
Jurkat T細胞（ATCC TIB-152）
凋亡誘導劑：Staurosporine（0.1-1 μM）
培養基：RPMI 1640 + 10% FBS
實驗設計
細胞接種→搖床預適應24h→梯度藥物處理→靜態對照，80/100/120rpm動態培養→24h凋亡檢測
檢測指標
Annexin V-FITC/PI雙染流式檢測
Caspase-3/7活性（Cellular Glo Assay）
線粒體膜電位（JC-1染色）
四、結果
凋亡動力學
培養模式 | 早期凋亡率（%） | 晚期凋亡率（%） |
靜態 | 24.3±3.5 | 18.2±2.8 |
80 rpm | 28.1±2.3* | 20.5±1.9 |
120 rpm | 32.7±2.1** | 22.9±1.7* |
(*p<0.05, **p<0.01 vs 靜態) |
機制驗證
120 rpm組Caspase-3活性升高2.1倍（靜態組參比）
線粒體去極化細胞比例達41.2%（靜態組：33.8%）
五、討論
二氧化碳恒溫搖床通過三重機制增強藥物敏感性：
流體剪切力（0.5-1.2 dyn/cm2）促進藥物-受體接觸
持續混勻避免局部pH/氧濃度梯度形成
機械應力調控Bcl-2/Bax表達平衡
與傳統六孔板相比，動態體系更接近淋巴結內淋巴細胞運動狀態（Huang et al., 2023），為免疫療法體外評價提供新策略。
六、結論
本研究證實二氧化碳恒溫搖床可顯著提升藥物誘導免疫細胞凋亡研究的可靠性，推薦100-120 rpm作為淋巴細胞研究優化參數。該模型適用于CAR-T細胞毒性藥物篩選、免疫檢查點抑制劑效價評估等前沿領域。
相關產品清單
溫馨提示：
1.本網展示的解決方案僅供學習、研究之用，版權歸屬此方案的提供者，未經授權，不得轉載、發行、匯編或網絡傳播等。
2.如您有上述相關需求，請務必先獲得方案提供者的授權。
3.此解決方案為企業發布，信息內容的真實性、準確性和合法性由上傳企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
