反相c18色譜柱是在硅膠上或雜化基質顆粒上鍵合了C18鍵合相的色譜填料所裝填的色譜柱，按反相色譜條件進行操作和分離。反相是液相色譜中常使用的分離模式，而C18柱是常使用的反相色譜柱之一。
反相色譜柱的選擇性主要為疏水作用、立體選擇性和氫鍵作用，還有一些二級作用，比如：離子交換、金屬螯合作用等。我們來分析下反相c18色譜柱的表征參數：
1.疏水作用（Hy）：通過相同流動相體系，在不同的反相色譜柱對進行乙基苯測試，考察乙基苯的保留因子，保留因子越大，柱的疏水作用越強。
2.立體選擇性（TFA）：通過相同流動相體系，在不同的反相色譜柱對進行阿米替林測試，考察阿米替林的拖尾因子，由于阿米替林特殊的立體結構，拖尾因子越小，色譜柱的立體選擇性越強，同時硅醇基作用較弱。
3.金屬雜質含量（CTF）：反相c18色譜柱中會殘留少量的金屬離子，一般金屬離子會與喹啉結構發生螯合作用，導致峰拖尾，故喹啉拖尾因子越大，柱金屬雜質含量越大。
4.氫鍵作用（CFA）：阿米替林是堿性化合物，在酸性或中性條件下呈離子態，保留因子較小，保留主要依靠氫鍵作用，阿米替林保留因子越大，柱氫鍵作用越強。
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