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當(dāng)前位置：杭州瑞析科技有限公司>>技術(shù)文章>>軟骨素酶ABC酶解--液相色譜法測定魚翅中的透明質(zhì)酸
1.儀器與試劑 配置紫外可見檢測器的HP-1100型液相色譜儀（美國惠普公司）；DU-600型紫外掃描儀（瑞士Beckman公司）；透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸二糖、三羥甲基氨基甲烷（Tris）、膠原酶、木瓜蛋白酶、軟骨素酶ABC均為Sigman產(chǎn)品；乙腈為色譜純；二次蒸餾水；其他所用試劑均為分析純。 2.色譜條件 色譜柱： ZORBAX 糖分析柱（4.6mmi.d. x 250mm, 5µm）；檢測器及檢測波長：紫外可見檢測器，226nm；流動(dòng)相V（乙腈）:V（0.5%磷酸）=2:98；用0.45µm濾膜抽吸過濾；進(jìn)樣量10µL；流速1ml／min；室溫下分析。 3.溶液的配制 透明質(zhì)酸二糖標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制：準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品，用0.2mol<LTris-HCl（Ph8.0）緩沖溶液溶解，稀釋定容為1g／L的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于冰箱中存放。實(shí)驗(yàn)時(shí)，其他濃度的標(biāo)準(zhǔn)液均由此溶液用0.2mol／L Tris-HCl（Ph8.0）稀釋而成。其他所用溶液均按常規(guī)方法配制而成。
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