液相色譜儀提高溫度往往有利于分離效果嗎？

   錯誤! 隨著溫度升高，流動相粘度下降，因此分析物傳質速率提高，所以就能夠提供更好的色譜分離效果。正確，但是除了柱效，溫度同樣影響保留因子（k）和選擇性（α）。溫度的變化因素能夠提高或降低分辨率（其實這也是色譜分析更關心的問題）。保留時間往往隨著溫度升高而降低，因為溫度作為一個熱力學參數，使得高溫度下分析物傾向于留在流動相中，會更快的從柱子上洗脫下來。然后，不同的化合物可能對溫度變化有不同響應程度的保留時間改變。更加確切的說，它們的范德霍夫線的斜率不同（ln k與1/T，T以溫度計量）；換句話說，α值會變化。另外溫度增加會使低k值的色譜峰出峰更快,甚至接近在無保留物質t₀附近出來,導致很難進行定量分析。

以analgesics（一種鎮痛藥，譯者注）為例，圖二顯示的一系列的色譜圖列出了七種鎮痛藥在柱溫20-90°C的分離情況。我們從中可以發現許多特點。首先，所有分析物隨著溫度升高，保留時間變短且峰變窄，意味溫度升高利于分離效果。其次，鎮痛藥之一的水楊酸（即阿司匹林）在峰5，6之間，隨著溫度變化位置改變較大。事實是在20-40°C時，該物質隨溫度變化，洗脫順序也發生了變化。在中間的30℃時，水楊酸和第6號峰的非那西丁一起出峰。所以，溫度大于40°C會引起分離時間變短和洗脫順序發生變化。

當然，一個提高溫度的好處在于降低了操作時的柱壓，以便于使用更大的流速和粒徑更小的填料。另一個在高溫下能夠導致色譜柱性能問題的因素是流動相的溫差。如果柱子在60°C下操作，但是流動相在室溫流入，那么進入的較冷的流動相就能夠引起峰變形，原因是不同溫度下分析物會趨向在高溫的流動相中。所以建議大家在較高溫度下使用色譜柱的時一定記得預熱流動相。