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酶的提取，分離純化和生產方法
點擊次數：3841 發布時間：2010-7-22
酶的提取，分離純化和生產方法
酶的提取，分離純化
（一）細胞破碎處理
許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶，首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多，主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜，使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變。酶學破碎法是指選用合適的酶，使細胞壁遭到破壞，進而在低滲溶液中將原生質體破碎。
（二）提取
酶的提取是指在一定條件下，用適當的溶劑處理細胞破碎后的含酶原料，使酶充分地溶解到提取液中的過程。酶的提取方法有過柱法、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機溶劑提取法等。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活，提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值，并且添加適量的保護劑。
（三）分離
提取液中含有多種酶，要想從提取液中分離純化出某一種酶，必須根據這種酶的特性，選擇合適的分離純化方法。酶分離純化的方法很多，可利用酶相對分子質量的大小進行分離純化，如通過透析的方法分離酶等。
酶的生產方法
酶的生產是指經過預先設計，并且通過人工控制而獲得所需要酶的過程。概括地說，酶的生產方法有提取法、發酵法和化學合成法三種。
（一）提取法
提取法是zui早采用并且一直沿用至今的一種方法。提取法采用各種技術，直接從動植物或微生物的細胞或組織中將酶提取出來。提取法雖簡單易行，但必須要有充足的原材料，這就使提取法的廣泛應用受到了限制。但是，在動植物或微生物資源豐富的地區，提取法仍然具有應用價值。例如，在屠宰廠，可從家畜胰臟中提取胰酶；在水果加工廠，可從菠蘿皮中提取菠蘿蛋白酶。
（二）發酵法
發酵法是20世紀50年代以來生產酶的主要方法。發酵法主要通過微生物發酵來獲得人們所需要的酶。發酵法一般包括固體發酵、液體深層發酵、固定化細胞發酵和原生質體發酵等多種方式。
（三）化學合成法
化學合成法是20世紀60年代末出現的一種生產酶的技術。1969年，美國科學家采用化學合成的方法獲得了含有124個氨基酸的核糖核酸酶。但是，化學合成法的成本比較高，并且只能合成那些已知化學結構的酶。所以，化學合成法目前仍然停留在實驗室內合成的階段。