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技術文章

微孔板恒溫振蕩器在牛奶抗原抗體反應的應用

點擊次數:4435 發布時間:2011-9-22

溶液的配制

 

1、稀釋抗體溶液:將抗體濃縮液搖勻,用緩沖液10倍稀釋抗體濃縮液,現用現配。

 

2、稀釋酶結合物:將酶結合物濃縮液搖勻,用緩沖液10倍稀釋酶結合物濃縮液,現用現配。

 

3、底物溶液的配制:用底物緩沖液10倍稀釋底物濃縮液,根據需要的量現用現配,底物溶液變藍禁止使用。

 

七、樣品的前處理方法:

 

    牛奶:新鮮牛奶或解凍牛奶50µL,加水950µL,1:20稀釋,作樣品液備用。

 

八、檢測步驟:

 

1、剪開錫箔袋,按每個標準液和樣品提取液2孔計算所需微孔板條的數量,插入框架。

 

2、各取系列標準液和樣品液20µL分別加到其對應微孔中,每個標準和樣品加雙孔。

 

3、每孔加稀釋好的酶結合物20µL。

 

4、每孔加稀釋好的抗體100µL,在MicBio-IV微孔板恒溫振蕩器上*混勻,用封口膜封好,室溫孵育30分鐘。

 

5、倒出孔內液體,在吸水紙上拍打,使孔中沒有殘留的液體。使用多道移液器,每孔加水250µL,再傾倒干凈。如此洗板,重復三次。

 

6、每孔加底物溶液100µL,室溫避光孵育30分鐘。

 

7 、每孔加終止液100µL,混勻。

 

8 、在450nm波長處測吸光度值。60分鐘內讀數。

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