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的細胞毒性檢測試劑盒^PLUS乳酸脫氫酶（LDH），可以進行均勻的格式，需要從細胞沒有轉讓和離心步驟，以分離上清液。的顯色反應可以停止用于定義測定條件。樣品材料：生長的細胞培養(yǎng)在96 -或384 -孔板可以直接測量。等分從其他格式的生長的培養(yǎng)可以不除去細胞的情況下轉移到96 -或384 -孔板用于測量，測定時間： 10?30分鐘進行孵化。靈敏度：少于100的溶解的細胞中可檢測到一個96孔的板。


 

細胞死亡是經典的質膜傷害的定量評價。廣泛使用的方法是基于差分吸收或排除的染料，如臺盼藍（trypan blue）和碘化丙啶，然后用顯微鏡計數。主要的缺點是，這些方法不容許大樣本號碼的處理。另一個組的檢測的基礎上釋放的放射性的同位素如[ ⁵¹訓練班]和[ 3 H ] -胸苷或熒光染料從prelabeled靶細胞。這些檢測方法的缺點是（i）該使用的放射性同位素在大部分時間里，（ⅱ）用于預標記的靶細胞的必要性，以及（iii）高大多數標簽從的prelabeled的靶細胞自發(fā)釋放的甲第三類型的檢測是基于對測量細胞質受損細胞釋放的酶的活性。酶釋放試驗已被描述（例如，堿性和酸性磷酸酶），然而，它們的使用是由低有關的酶的量是本在許多細胞阻礙，并且由精心制作的定量酶活性所需的動力學分析。與此相反，乳酸脫氫酶（LDH）是一種穩(wěn)定的細胞質酶是存在于所有細胞。它正迅速釋放到質膜的損傷的細胞時的培養(yǎng)物上清液。

1. 催化劑（心肌黃酶/ NAD ⁺的混合物）
2. 染料溶液（INT和乳酸鈉）
3. 裂解液
4. 一站式解決方案

的培養(yǎng)物與催化劑的制備及染料的基片從該試劑盒中的混合物。對于總細胞數的計數，在裂解溶液之前加入的底物反應。反應后，測定被終止通過添加終止液。乳酸脫氫酶（LDH）活性，是由一個耦合的酶促反應，從而使四唑鎓鹽INT被還原成甲臜。死或血漿膜損壞的細胞的結果，在培養(yǎng)上清中的LDH酶活力增加的量的增加。上清液中的酶活性的量的增加，在有限的時間期間形成的甲（formazan）的量直接相關。所形成的甲臜染料是水溶性的，并示出了廣泛的大吸收波長為約500nm。對于典型的實驗中，請參閱圖1 -圖3。
 

圖1：從U-937細胞，在整個細胞培養(yǎng)物中的不同數目的總乳酸脫氫酶（LDH）活性測定。此圖顯示了與基板的細胞毒性檢測試劑盒^PLUS（LDH）的混合物從有5分鐘的溫育后的值。

圖2：此圖顯示了從U-937細胞，在整個細胞培養(yǎng)物中的不同數目的總乳酸脫氫酶（LDH）活性測定。細胞數的值的下降，以每孔100個細胞孵育30分鐘后與基板。

圖3：對U-937細胞的細胞毒性活性的放線菌素D的測定不同濃度的放線菌素D，添加到細胞中，在使用的細胞毒性檢測試劑盒^PLUS乳酸脫氫酶（LDH）（= LDH ^PLUS）及細胞培養(yǎng)和細胞毒性測定擴散試劑WST-1（WST-1）。