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當蛋白質的zui適穩定量及標記的*pH值被確定以后，便可進行標記。具體步驟如下。

（1）根據標記所用膠體金的總量計算出所需要待標記蛋白質的總量。

（2）邊攪拌邊將蛋白質溶液加入膠體金溶液中，逐漸加入，lmg的蛋白質量大約需5min，或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質溶液中，大約需5～10min。

（3）繼續攪拌10min，然后加入5％BSA使其終濃度為1％，或加入3％聚乙二醇（PEG，Mr：20000）使其終濃度為0．05％，其效果BSA要優于PEG。

（4）將標記好的膠體金裝入透析袋中，兩頭扎緊，放人蔗糖或硅膠中濃縮，濃縮到原體積的1/10量，濃縮完畢后純化。如用離心純化方法時，不需要濃縮。