化工儀器網
公司動態
噬菌體制備及定量的一般實驗方案
閱讀：592 發布時間：2010-11-23大部分噬菌體展示方案都涉及這樣一個基本步驟：從被感染的細菌中制備噬菌體或噬菌粒顆粒的儲液（增殖），并滴定這些儲液以測定有感染力的顆粒的濃度。對于噬菌體載體（以及輔助噬菌體），對于噬菌體載體（以及輔助噬菌體），要通過計數宿主菌菌苔上的噬菌體斑來測定這些可變顆粒的濃度。為了確保能得到一個能繁殖的噬菌體的純培養物，任何時候增殖噬菌體載體或輔助噬菌體，按照這個步驟來進行噬菌斑的分離都是可取的。
對于噬菌粒載體，噬菌粒的滴定涉及對細菌的感染，以及對得到的抗生素耐受性的克隆的計數。
測定噬菌體或噬菌粒制備產物感染力的一個簡便的替代方案是通過吸光度評估濃度。消光系數（extinctioncoefficient）取決于噬菌體顆粒的大小，而噬菌體顆粒的大小又取決于基因組的大小。一般而言，對于一個輔助噬菌體如VCSMl3，lOD270=1．1X1013個顆粒／m1。但基于吸光度的計算可能對能繁殖的、有感染力的顆粒的濃度評估過高