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一文盤點(diǎn)液相色譜柱的那些事兒

閱讀:2713      發(fā)布時間:2021-9-13
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  液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件之一,樣品中各種離子的分離均在色譜柱中完成,并且一般比常規(guī)液相色譜柱價格要貴很多。因此,對液相色譜柱的維護(hù)保養(yǎng)十分重要。
  1、接液相色譜柱前確保系統(tǒng)已清洗干凈。色譜柱在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動;很多單位的液相色譜儀是陰、陽離子混用的,因此,接色譜柱前,一定要保證整個液相色譜儀上的所有閥件或管路已清洗干凈,避免造成色譜柱堵塞。
  2、確保色譜柱不進(jìn)入顆粒物。樣品一定要經(jīng)過預(yù)處理,去除顆粒物等會給泵和色譜柱帶來負(fù)擔(dān)的物質(zhì)。
  3、確保液相色譜柱不干燥。每天分析工作結(jié)束后,要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品,還要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣砬逑粗蝗舴治鲋L期不使用,要參照色譜柱保存辦法,在沖洗干凈后,對陰離子柱要通入一定濃度的堿對陽離子柱要通入一定濃度的酸,并將色譜柱取下兩端密封保存。
  4、確保戴安離子色譜在一定壓力、流速條件下運(yùn)行。儀器使用時一定要先檢查整個流動管路中是否有氣泡,如果有,需要先將氣泡排除后再將色譜柱接上,防止將氣泡帶到色譜柱中。因為色譜柱中裝填的樹脂顆粒很小,氣泡進(jìn)入后將影響樹脂和樣品中離子的交換,同時氣泡也將影響基線的穩(wěn)定性。
  液相色譜柱的維護(hù)分為:色譜柱的平衡、色譜柱的再生、zui后才是色譜柱的維護(hù)。下面詳解:
  1.色譜柱的平衡
  反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得zui大的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!操作步驟:
  a.平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)
  b.如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
  2.色譜柱的再生
  長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)。可以對色譜柱進(jìn)行再生,在有條件的實驗室應(yīng)使用一個廉價的泵進(jìn)行柱子的再生。
  選擇再生方法:
  極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生:
  正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**
  非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水。

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