久久国产精品午夜一区_91精品國產高清久久久久久91_?级毛片免费全部播放_欧美色图在线视频一区二区三区_国产综合亚洲一区二区三区_中文字幕熟女网_国产精品男人爽免费视频_九九无码网战_亚洲日本三级电影在线观看_欧美日韩DVD手机在线不卡

上海研謹生物科技有限公司

幾種 HRP常用底物及其操作

時間:2025-5-9閱讀:181
分享:

幾種 HRP 常用底物及其操作

底物范圍較廣,包括二氨基聯(lián)苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。

二氨基聯(lián)苯胺/金屬鹽
DAB是辣根過氧化物酶最敏感、常用的底物。它產(chǎn)生強烈的棕色產(chǎn)物,在水和醇中不溶解。多數(shù)情況下,推薦在DAB中加入不同的金屬離子。當加入金屬鹽如鈷、鎳至底物液中,辣根過氧化物酶可以更加敏感。此類反應(yīng)產(chǎn)物呈暗藍灰色至黑色,且在水及醇中穩(wěn)定。DAB/金屬鹽染色應(yīng)用的組織染色范圍較廣。

   1.需要的溶液和特殊設(shè)備
   DAB,0.05mol/LTris緩沖液(pH7.6);
   0.3%(W/V)氯化鎳/水貯存液;
   30%過氧化氫;
   DPX。
   光學顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)
   2.操作步驟
   (1)用9ml 0.05mol/L Tris緩沖液(pH7.6)溶解6mgDAB;
   (2)加lml 0.3%(W/V)氯化鎳/水貯存液(也可以用等量的氯化鈷替代);
   (3)加0.1 m1 3%過氧化氫。過氧化氫一般以30%的溶液提供,貯存在4E,此條件可以持續(xù)1個月;
   (4)如果出現(xiàn)沉淀,用濾紙過濾;
   (5)加此溶液至標本,并孵育1—20min水洗終止反應(yīng);
   (6)優(yōu)化:如果需要可復染;
   (7)用DPX封片。

氯萘酚
   氯萘酚可以形成一種藍黑色產(chǎn)物。敏感性低于DAB,且產(chǎn)物可溶于醇中。它適用于當DAB反應(yīng)形成較高背景或要求改變產(chǎn)物的顏色。

   1.需要的溶液和特殊設(shè)備
   0,03%氯萘酚,用無水乙醇溶解(貯存在-20℃),0.05mol/LTris(pH7.6)
   過氧化氫;
   Gelvatol或者Mowiol。
   光學顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。

   2.操作步驟
   (1)氯萘酚貯存液的準備:用10ml無水乙醇溶解0.3g氯萘酚,貯存于—20℃;
   (2)加100ul氯萘酚貯存液至10ml 0.05mol/LTris(pH7.6),
   (3)加0.1ml 3%過氧化氫于水中。過氧化氫一般是以30%的溶液提供,4℃可存放1個月;
   (4)白色沉淀可用濾紙過濾去除;
   (5)加此溶液到標本中,并在室溫孵育10~40min,水洗終止反應(yīng);
   (6)優(yōu)化:如果需要,進行復染,但只可使用水溶性染料;
   (7)用Gelvatol或者Mowiol封片。

氨乙基咔唑
   氨乙基咔唑(AEC)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反應(yīng)產(chǎn)生較高背景或要求改變產(chǎn)物顏色的試驗。此產(chǎn)物可溶于醇,但不溶于水。

   1.需要的溶液和特殊設(shè)備
   0.4%AEC用N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解;
   0.1mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2);
   過氧化氫;
   Gelvatol或Mowi01.
   光學顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。

   2.操作步驟
   (1)用lmlDMF溶解4mgAEC。AEC在DMF中穩(wěn)定,因此,可以用100mlDMF溶解0.4gAEC作為貯存液備用;
   (2)加lmlAEC溶液至15ml 0.1mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH5.2)中,并攪拌;
   (3)加0.15ml 3%過氧化氫于水中。過氧化氫一般是30%的溶液提供,在4℃可存放1個月;
   (4)用濾紙過濾;
   (5)加此溶液到標本中,并于室溫孵育10~40min,水洗終止反應(yīng);
   (6)優(yōu)化:如果需要復染,只可用水溶性染料;
   (7)用Gelvatol或Mowiol封片。


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 宜都市| 榆林市| 铁岭市| 玛多县| 腾冲县| 沙湾县| 蒙自县| 金华市| 龙海市| 台州市| 东丽区| 莱阳市| 宿松县| 庆安县| 汝城县| 丰镇市| 新泰市| 湖南省| 那曲县| 孟州市| 文昌市| 民权县| 峨眉山市| 延庆县| 泰顺县| 肥城市| 紫云| 琼海市| 湾仔区| 怀化市| 南江县| 乌恰县| 长沙市| 杭州市| 扶风县| 石屏县| 温州市| 资兴市| 天全县| 肥西县| 蒲城县|