*，制藥領(lǐng)域中許多生物分析化合物都是堿性的，可以通過疏水性或陽離子交換吸附劑輕易地提取。不過，降脂他汀類和抗炎藥卻大多是酸性的。使用傳統(tǒng)的疏水性方法無法提取這些酸性化學(xué)物。因此，安捷倫開發(fā)出一種命名為Bond Elut Plexa PAX的新型聚合物強(qiáng)陰離子交換填料，專門用于簡化該提取過程。
圖 1. 使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 從血漿中提取酸性藥物。（放大 圖片）
我們開發(fā)了一種簡單通用的方法，使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性化合物。為了評估該方法的性能，我們測定了吸附劑床的分析物回收率、提取樣品響應(yīng)的線性以及加標(biāo)血漿樣品分析的準(zhǔn)確性和度。
由于方法的驗證過程非常耗時并且需要準(zhǔn)確度*的數(shù)據(jù)，因此只有速度快、回收率好、重現(xiàn)性高的固相萃取（SPE）方法才能令人滿意。如果能對 SPE 過程進(jìn)行優(yōu)化且不損害數(shù)據(jù)完整性，便能夠簡化和縮短方法的驗證過程。Bond Elut Plexa 系列采用通用的方法，zui大程度縮減方法開發(fā)過程，同時還提高了分析靈敏度和重現(xiàn)性。
我們使用安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 96 孔板和2% NH4OH 、5% 甲酸進(jìn)行提取。圖 1 顯示了提取流程。將所有樣品蒸干，接著使用5 mM 80:20 的甲酸銨: CH3OH 水溶液定容至 100 µL。然后在安捷倫 325-MS LC/MS（采用 vESI 離子源）儀器上進(jìn)行液相色譜/質(zhì)譜分析。
我們通過測定分析物響應(yīng)并將其與加標(biāo)流動相標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較來計算回收率。由于提取效率低、離子抑制效應(yīng)或未洗脫導(dǎo)致的分析物損耗均會體現(xiàn)在回收率上。盡管一些回收率在 50% 至 60% 的范圍內(nèi)，但響應(yīng)是線性的，因為方法的曲線線性良好，準(zhǔn)確性高。所有藥物的回收率均高于 50%，且重現(xiàn)性良好，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）低于 7%（表 1）。
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| 表 1.安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性藥物的回收率。 | 圖 2.安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性藥物的回收線性良好。 （放大 圖片） | 圖 3. 安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 從人體血漿中提取的 50 ng/mL 樣品的色譜分析結(jié)果。（放大 圖片） |
從 0.5 到 200 ng/mL 的線性良好（圖 2）.選擇 50 ng/mL 的中點濃度測定校正曲線的準(zhǔn)確度 （表 2）. zui后， 圖 3 顯示的樣品色譜結(jié)果展示了該方法有效性。
藥物 | 0.5 ng/mL | 50 ng/mL | ||
|---|---|---|---|---|
準(zhǔn)確度 （%） | % RSD （n=8） | 準(zhǔn)確度 （%） | % RSD （n=8） | |
| 阿托伐他汀 | 90 | 11 | 106 | 11 |
| 雙氯芬酸 | 116 | 14 | 109 | 6 |
| 速尿 | 99 | 14 | 95 | 9 |
| 酮基布洛芬 | 104 | 13 | 108 | 4 |
| 普伐他汀 | 108 | 9 | 96 | 8 |
表 2. 校正曲線的準(zhǔn)確度。
上述結(jié)果表明，安捷倫 Bond Elut Plexa PAX 使用此簡便方法提取酸性化合物異常簡單。更好的是，該吸附劑對所有化合物都能提供較高的回收率，人體血漿中 0.5 至 200 ng/mL 的藥物樣品能夠獲得良好的線性。此外，校正曲線也呈線性，一階線性回歸的相關(guān)系數(shù)均大于 0.995。對于所有化合物而言，該方法準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，大多數(shù)結(jié)果都在實際值的 ±10% 以內(nèi)，RSD 低于 15%。
全面了解安捷倫 Bond Elut解決方案。然后將安捷倫 Bond Elut Plexa PAX和固相萃取產(chǎn)品組合引入您的實驗室。
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