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培養基的滅菌及準備

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培養基的滅菌及準備

B大豆酪蛋白瓊脂培養基(TSA)培養基的滅菌及準備

B1.1 培養基采用大豆酪蛋白瓊脂培養基,可以按以下處方制備,也可使用按該處方的符合要求的脫水培養基。配制后按培養基規定的經驗證合格的滅菌程序滅菌。

B1.2 大豆酪蛋白瓊脂培養基配方

酪蛋白胰酶消化物…………………………………………………………………  15g

大豆粉木瓜蛋白酶消化物…………………………………………………………   5g

氯化鈉………………………………………………………………………………   5g

瓊脂…………………………………………………………………………………  15g

純化水…………………………………………………………………………… 1000mL

取上述成分除瓊脂,混合,微熱溶解,調節pH值使滅菌后為7.3±0.2,加入瓊脂,加熱融化后,分裝,滅菌,冷卻至約60℃,在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿(φ90mm1)中。加蓋后在室溫放至凝固。

B2  沙氏瓊脂培養基(SDA)培養基的滅菌及準備

葡萄糖………………………………………………………………………………  40g

酪蛋白胰酶消化物、動物組織的胃酶消化物等量混合…………………………  10g

瓊脂…………………………………………………………………………………  15g

純化水…………………………………………………………………………… 1000mL

取上述成分除瓊脂,混合,微熱溶解,調節pH值使滅菌后為5.6±0.2,加入瓊脂,加熱融化后,分裝,滅菌,冷卻至約60℃,在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿(φ90mm1)中。加蓋后在室溫放至凝固。

B3  培養基平皿培養及保存

制備好的培養基平皿宜在2~8℃保存,一般以一周為宜或按提供的標準執行。采用適宜方法在平皿上做好培養基的名稱、制備日期記錄的標記。

1) 如果用其他規格的平皿,可適當增減培養基的量,使之在平皿中形成至少2 mm厚的瓊脂層。

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