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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒
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- 上海研生實業(yè)有限公司
- 1440 - 3000 （具體成交價以合同協(xié)議為準）
- 2024-09-02 17:50:28
- 上海市
- 國產(chǎn)
- 1823
【詳細說明】
二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒
商品詳情：
測定意義：
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一個關(guān)鍵酶，既控制著CO2的固定，同時又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流，其活性的大小直接影響著光合速率。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3288 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3288-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
YSH3288-1 | 25管/24樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理：
在Rubisco的催化下，1分子的核酮糖-1，5-二磷酸(RuBP)與1分子的CO2結(jié)合，產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA)，PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用，產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸，并使還原型輔酶I(NADH)氧化。因此，340nm吸光度的變化可計算還原型輔酶I氧化速率，還原型輔酶I氧化速率可反應(yīng)Rubisco的活性。
需自備的儀器和用品：
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：
1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。
2.細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3.血清等液體：直接檢測。
計算公式如下：
1、血清（漿）LAP活力的計算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細菌或細胞總數(shù)，2000萬。
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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒超微量Ca2+Mg2+-ATP酶(測紅細胞)測試盒/比色法100管/50樣
超微量Ca2+Mg2+-ATP酶(測組織、普通細胞)測試盒/比色法50管/25樣
超微量Ca2+Mg2+-ATP酶(測組織、普通細胞)測試盒/比色法100管/50樣
超微量Ca-ATP酶(測紅細胞)測試盒50管/25樣
超微量Ca-ATP酶(測紅細胞)測試盒100管/50樣
超微量Ca-ATP酶(測組織、普通細胞)測試盒50管/25樣
超微量Ca-ATP酶(測組織、普通細胞)測試盒100管/50樣
超微量Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶(測紅細胞)測試盒150管/50樣
超微量Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶(測紅細胞)測試盒75管/25樣
注意事項：
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實驗結(jié)果的準確性，需先取1-2個樣做預(yù)實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4．檢出限為100μmol/L。