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NAD激酶(NADK)測試盒
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- 上海研生實業有限公司
- 360 - 660 （具體成交價以合同協議為準）
- 2024-09-02 18:16:08
- 上海市
- 國產
- 1433
【詳細說明】
商品屬性：
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3230 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3230-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
商品詳情：
NAD激酶(NADK)測試盒測定意義：
NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測定原理：
NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(MTT)，通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。
試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。
標準品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標準液，4℃避光保存。
測定操作：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調節波長到570 nm，蒸餾水調零。
2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。
3. 標準管：取EP管，加入10μL標準品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。
4. 測定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數次，于570nm測定吸光值，記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。
注意：空白管和標準管只需要測定一次。
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