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上海研生實業(yè)有限公司

胚胎成纖維細胞,沙眼衣原體PCR檢測試劑盒

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果膠甲酯化程度測試盒

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【詳細說明】

商品屬性:

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規(guī)格

檢測方法

YSH3308

100管/96樣

微量法

YSH3308-1

50管/48樣

可見分光光度法


商品詳情:
果膠甲酯化程度測試盒測定意義

植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運輸?shù)茸饔猛猓€具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。

測定原理

果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應顯色,在412nm下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基ben酚反應產(chǎn)生有色物質(zhì),在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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