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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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供應(yīng)簡(jiǎn)介

本產(chǎn)品使用Protein A與Protein G的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合后的重組蛋白和4％濃度的瓊脂糖樹(shù)脂偶聯(lián)制成。

詳細(xì)介紹

Protein A/G-Plus Beads抗體純化柱使用說(shuō)明

【產(chǎn)品說(shuō)明】
   本產(chǎn)品使用Protein A與Protein G的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域融合后的重組蛋白和4％濃度的瓊脂糖樹(shù)脂偶聯(lián)制成。由于采用了重組表達(dá)的Protein A/G，并去除了其白蛋白結(jié)合區(qū)，該基質(zhì)能夠特異性地結(jié)合多種免疫球蛋白的Fc區(qū)段，作為親和樹(shù)脂，可用來(lái)純化不同來(lái)源的抗體和抗體亞型，以及在免疫共沉實(shí)驗(yàn)中捕獲免疫復(fù)合物。本產(chǎn)品使用了多位點(diǎn)交聯(lián)技術(shù)，穩(wěn)定性好、特異性高并具有廣譜結(jié)合力，每ml基質(zhì)可特異性結(jié)合6-10 毫克抗體。
【產(chǎn)品組分】
    50％ Protein A/G Agarose懸液，PBS，20％乙醇
【儲(chǔ)存條件】
    4℃保存，有效期一年；常溫（15~25℃）運(yùn)輸；切勿凍結(jié)！
【抗體純化】
    1）取適量Protein A/G Agarose懸液，裝入層析柱，用10倍柱體積的PBS（或者TBS，下同）洗滌平衡層析柱。
    2）含抗體的血清或其它體液高速離心后，將上清與等體積2×PBS緩沖液混合，調(diào)整pH以及離子濃度后，緩慢加入層析柱。
    3）用10倍柱體積以上的PBS洗滌，至流出液無(wú)蛋白檢出。
    4）加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸（Citrate Acid, pH 2.7），夾住流出管，靜置5分鐘后收集穿出液，重復(fù)三次。測(cè)定OD280估算抗體濃度，如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M甘氨酸（Glycine, pH 3.0）洗脫。
    5）洗脫后的抗體加入2/5體積的1 M Tris，pH 8.0中和，使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液，通常為2×PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
    6）濃縮到所需體積，加入50%甘油；測(cè)定效價(jià)后，分裝并保存在-20℃，避免凍結(jié)。
敬請(qǐng)關(guān)注：

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