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今日分享:ELISA實驗條件如何選擇

閱讀:1924          發布時間:2016-9-6

   在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇十分重要,今日上海恒遠就帶您大概了解一下實驗條件的選擇包括哪些:
1.固相載體的選擇:
   載體的種類有多種,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纖維素等,我們通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其優點在于吸附蛋白的性能較好,操作簡便、用量小、適于大批檢測。
2.載體的吸附條件:
   載體的吸附均為物理吸附,吸附一般要求PH在9.0~9.6之間。時間、溫度、蛋白的濃度、離子的強度一定要恰到好處。一般采用4℃過一夜。   
3.酶標抗體使用濃度的確定:
   于聚苯乙烯板中加足夠的抗體包被溫育一定時間, 酶標結合物倍比稀釋,找出OD值1,為zui合適酶標抗體稀釋度。 
4.抗原的要求:
   用于ELISA的抗原必須采用相當純的抗原,如果含有其它雜質,將與抗原共同競爭的固相載體上的有限位置。
5.抗體的要求:
   一定是要與抗原對應的抗體,化學結構和空間結構上其具有很高特異性反應。
6.反應時間:
   抗原與抗體、抗體與酶標抗體反應一般在37度1~2小時達到高峰。時間太短敏感性下降,時間太長吸附的抗原或復合物可能脫落。

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