化工儀器網
技術文章
ELISA試劑盒實驗過程血清為何要稀釋
閱讀：4473 發布時間：2020-5-20每一盒ELISA試劑盒試劑盒里面都有一份對應的說明書，而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋份額，為何樣本都需求稀釋呢?今日的文章中，公司將為您剖析：為何ELISA實驗血清樣本都需求稀釋?
在ELISA試劑盒實驗血清為何要稀釋？有兩個原因：
1.比賽按捺對比明顯，應稀釋比賽物；
2.以下降非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假如你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數必定要事前確認，但也不必一點點，你做一個預實驗即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來的曲線對比靈敏。
ELISA試劑盒實驗稀釋血清的過程：
1、先把蛋白稀釋一定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確認一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板。
2、再用一定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進行孵育后洗刷，再加酶結合物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反應后分別測定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為適包被濃度。一般總是要挑選那個O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值要求<0.1-0.2。也便是要求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有明顯差別。