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配制步驟：
取無水吡啶133mL與碘42．33g，置入具塞棕色試劑瓶中，振搖至碘全部溶解后，加入無水甲醇333ml。稱量試劑瓶重，通入經濃硫酸脫水的二氧化硫氣體至試劑瓶增重32g，將瓶塞塞牢、搖勻，于暗處放置48h后標定。依此配制的卡爾-費休試劑的滴定度約為含水3-5g／mL。當使用試劑瓶時，可在通二氧化硫至增重32g時，把液面的位置作一標記，以后每次配制，只需取一定量的各物質置入試劑瓶中，通入二氧化硫氣體，使試劑溶液掖面升高至標記處即可，這樣可省去費時的稱重操作。
為使卡爾-費休試劑穩定，有另一種配制方法，即先配成二組溶液，在使用前混合。一組為碘和甲醇溶液I；另一組為二氧化硫和吡啶溶液II。
溶液I：取碘63g，置入試劑瓶中，加366mL無水甲醉，括至碘全部溶解。
溶液II：取100mL無水吡啶，置入試劑瓶小，準確稱量，然后通入干燥的二氧化硫氣體，使其增重32g。
新配制的卡爾-費休試劑很不穩定，隨放置時間增加，濃度逐漸降低。在前二、三日內，滴定度有顯著下降，以后降低緩慢，一周以后，滴定度每日約減少1%，之后則變化更趨緩慢。滴定度開始迅速下降的原因主要是試劑中各組分所含殘存水分的作用，隨后滴定度緩慢下降的原因則是副反應的影響。
因此，卡爾-費休試劑配制以后，應放置一周以上，用前標定。
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