二氧化碳培養箱的工作原理：
一、氣路的控制：
1.氣路由高濃度的二氧化碳鋼瓶、氣泵、穩壓閥、針型閥，電磁閥、流量計及儲氣瓶等組成。
2.當輸入一定壓力的高濃度二氧化碳氣體，通過調節閥、針閥及電磁閥的流量、時間控制，保證一定量的二氧化碳氣體進入工作室，達到自動控制工作室內的二氧化碳濃度值。
3.在二氧化碳培養箱工作過程中，由儲氣瓶對工作室內進行補氣，以保持穩定的二氧化碳濃度值。
二、溫度的控制：
1.二氧化碳培養箱溫度控制器由Pt100鉑電阻作為傳感器與數字控制電路、LED數字顯示電路等組成，當傳感器輸出與溫度成正比的電阻信號轉換成電壓信號經電路放大后，一路送至顯示電路顯示實測溫度。另一路送至比較器與設定值比較。
2.當二者產生偏差時，觸發可控硅功率管輸出功率使加熱管產生熱量。當偏差減小直至為零時，其加熱管發出的熱量亦隨之減小，直至停止加熱。
3.當二者產生偏差時，觸發可控硅功率管輸出功率使加熱管產生熱量。當偏差減小直至為零時，其加熱管發出的熱量亦隨之減小，直至停止加熱。
4.控制線路中有超溫及水位報警功能。當顯示溫度超過設定值2.0℃時，溫度控制器發出聲光報警信號，同時切斷輸出，停止加熱，防止溫度繼續上升；當水箱內水位過高或過低時，水位控制器發出聲光報警信號，同時切斷加熱輸出。
三、濕度的控制：
1.因培養物需工作室內保持一定的濕度時，二氧化碳培養箱配有水盤。用戶可在培養時將水盤放入工作室內，水盤加上適量的蒸餾水讓其在工作室內自然蒸發，一般相對濕度可達95%。
 
二氧化碳培養箱的使用方法：
 
1、灌水
a)首先關閉培養箱底部水開關，然后將灌滿水的橡膠管一端連接上，另一端則浸沒在盛滿水的容器底部，并使該容器放于培養箱頂，通過水位差原理進水，接著打開底部水開關，容器中的水即漸漸灌入水套。
2、面板功能操作
a)箱溫設定：按一下“溫度設定"鍵，配合“增加"鍵和“減少"鍵，可設置您需要的溫度。
b) CO2濃度設定：按一下“濃度設定"鍵，配合“增加"鍵和“減少"鍵，可設置需要的濃度。如果不需CO2濃度控制時，請將濃度的設定值設為0，可延長電磁閥的使用壽命。
3、二氧化碳濃度控制檢查：在箱溫到達37℃，恒溫二小時后進行檢查。
a)打開鋼瓶，減壓閥輸出壓力調節在0.05MPA，使二氧化碳氣體進入箱內，1分鐘后可見顯示屏上濃度值逐漸升高，10分鐘左右即可達到5.0%（設定值為5.0%），穩定二小時，濃度顯示值應該在（5±0.3）%范圍內波動。工作正常。
b)外門打開時，可自動切斷二氧化碳進氣，節約用氣。
4、門溫控制檢驗
箱后門溫設定值設在38℃，在箱內放有加濕槽情況下，玻璃門上應無凝水。經過上述步驟檢查后，培養箱能正常工作，即可投入正常使用。