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電話：86-020-82574011
傳真：86-020-32206070
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網址：www.jianlun.com
商鋪：http://www.mcstair.com/st199246/
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供求商機
【產品簡介】
H7N9禽流感病毒核酸熒光PCR測定試劑盒
【詳細說明】
H7N9禽流感病毒檢測試劑盒， H7N9禽流感病毒診斷試劑盒， H7N9試劑盒
H7N9禽流感病毒核酸熒光PCR測定試劑盒
Avian influenza virus （H7N9） Real Time RT-PCR Kit
H7N9禽流感病毒試劑產品專線:189 2505 2681
【產品名稱】
通用名稱：禽流感病毒H7N9核酸測定試劑盒
英文名稱：Avian influenza virus （H7N9） Real Time RT-PCR Kit
【包裝規格】 25T/盒
【預期用途】通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進行定性檢測，可用于臨床對可疑感染患者的病原學鑒別診斷。
【檢驗原理】本試劑盒采用聚合酶鏈式反應（PCR）技術結合熒光探針技術，對禽流感H7N9特異性核酸片段進行熒光PCR檢測。
【試劑盒主要組成成份】
| 序號 | 組分 | 數量 | 體積／人份 | ||
| 1 | H7N9核酸熒光PCR檢測混合液 | 480?l×1 | 19?l | ||
| 2 | RT-PCR酶 | 28?l×1 | 1?l | ||
| 3 | DEPC-H2O | 400?l×1 | |||
| 4 | 陽性對照品 | 30?l×1 | |||
說明：不同批號的組分不可以互換使用。
自備試劑：Trizol；氯仿；75%乙醇；異丙醇或磁珠法RNA提取試劑；本公司可以代為訂購或提供銷售商。
【儲存條件和有效期】 試劑盒應在－20℃及以下溫度避光保存，有效期12個月。采用冰盒行運輸；熒光PCR檢測混合液反復凍融不宜超過3次。
【適用儀器】 本試劑盒適用于ABI7000，ABI7300，ABI7500，ABI7900，MJ-chromo4，MX3000P，MX3005P，SmartCyclerⅡ，Rotor-Gene6000，Lightcycler R480，iCycleriQ4，iCycleriQ5，Bio-Rad CFX96，SLAN等多色熒光PCR儀及相應軟件。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球將試管塞緊后，密閉送檢。標本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100?l氯仿， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應管數）,振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環參數設置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環45次;單點熒光檢測在60℃，反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。
備注：如使用ABI系列PCR儀，請務必于passive reference 和 quencher處均選擇“none”。
5. 閾值設定
閾值設定原則以閾值線剛好超過DEPC-H2O的zui高點。
6. 質量控制：試劑盒各對照品須達到以下要求，否則實驗視為無效。
| Ct值 | |||
| FAM通道（檢測H7） | HEX/VIC/JOE（檢測N9） | ||
| DEPC-H2O | UNDET或45 | UNDET或45 | |
| 陽性對照品 | ≤35 | ≤35 | |
7. 試驗結果的判斷
| 通道 | Ct值 | 結果判斷 | |
| 1 | FAM+HEX | UNDET或45 | 樣本低于檢測限，報告為陰性 |
| 2 | FAM+HEX | ≤43 | FAM通道為H7基因陽性； HEX/VIC/JOE通道為N9基因陽性 |
| 3 | FAM+HEX | 43～45 | 復檢一次,如仍為43～45,則報告為陰性 |
進行定量檢測時，儀器生成標準曲線后，自動顯示待檢樣品定量值。
【參考值范圍】陰性（檢測對象H7N9為病原微生物，在健康人體中不存在）。
【對檢驗結果的解釋】實驗室環境污染，試劑污染，樣品交叉污染會出現假陽性結果；試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果。
【檢驗方法的局限性】當檢測樣本中被檢核酸濃度含量低于zui低檢測限5×103copies/ml時可能會發生假陰性的結果。
【產品性能指標】zui低檢測限：1×103copies/ml；
【注意事項】 開始檢測前請仔細閱讀本說明書全文。
1. 整個檢測過程應嚴格分在三區進行：PCR反應體系的配制區；標本處理、加樣區；PCR擴增、熒光檢測及結果分析區。各區使用的儀器、設備、耗材和工作服應獨立。實驗后即請清潔工作臺，并進行消毒。
2. 使用不含熒光物質的一次性手套（經常替換） 、一次性離心管、自卸式移液器和帶濾嘴吸頭。
3. 試劑準備和標本處理應使用超凈工作臺（負壓式）或防污染罩，以防止對環境污染。
4. 每次實驗應設置陰、陽性對照品。
5. 操作人員應經過專業培訓，具有一定經驗和操作技能。
6. 操作臺、移液器、離心機、PCR擴增儀等儀器設備應經常用10%次氯酸或75%酒精、紫外線燈或臭氧消毒處理。
7. 實驗中接觸過標準品和對照品的廢棄物品（如吸頭）、擴增完畢的離心管、標本等應進行無害化處理后方可丟棄。
8. 試劑使用前應在常溫下充分融化并混勻。
9. PCR反應混合液應避光保存。
10. 反應管中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊。
11. 不同批號的試劑請勿混用，請在有效期內使用試劑盒。
【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
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