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技術文章

上海恒遠邀您來看ELISA測定結果分析方案

閱讀:1839          發布時間:2018-12-12

    日前上午,我公司錢經理收到浙江大學鄭老師發來的qq會話 。鄭老師表示:ELISA試劑盒的檢測結果不理想,不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因,我自己合成8個氨基酸的抗原短肽,和BSA耦連后免疫動物,1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小時, 再用1%OVA37度封閉2小時,洗板3次。待測血清用10%小牛血清倍比稀 釋,37度溫育1小時,洗板3次,加入二抗,37度溫育40分鐘,洗板3次 ,加TMB顯色,結果比較詭異,陰性對照也顯色了,且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢?是洗板的問題嗎?


    錢經理將問題轉至技術部,上海恒遠生物公司專業技術員回應, ELISA結果不理想原因可以根據這幾個方面分析:
    1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;你一抗、二抗 每次洗板時洗5遍以上。
    2.封閉液的問題,你說陰性對照也顯色了,那主要的問題應該是封閉,應重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話 可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關的帖,你搜一下看看。
    3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時,這樣的效果可能會好 一些。


    上海恒遠生物公司為您提供BIM、R&D、TSZ品牌ELISA試劑盒,制備齊全,種屬涉及人、大鼠、小鼠、豬、雞、植物等。保證質量,*,提供全程技術指導服務,歡迎您致電我司錢經理咨詢。

            

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