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技術文章

ELISA試劑盒實驗的結果判斷方法

閱讀:2217          發布時間:2018-12-26

    要完成一項漂亮的ELISA實驗,不光要做足實驗的準備,還要熟練掌握操作方法及技巧,后就是實驗的結果了。那么ELISA試劑盒實驗的結果如何判斷分析呢?


1.儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IFN-Y標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3.檢測值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml


    ELISA的試驗結果可用肉眼觀察顏色反應的深淺作出判斷,也可用分光光度計作測定。當然,后者更為正確。而肉眼觀察更為簡便,而且也有一定正確性。據Adler(1980)報告,目測為±1+、2+、3+、4+相當于分光光度計測定O.D值。


    不論用哪種方法判定結果,每次都要有陽性和陰性參考血清作對照,這樣可以消除一些外界的影響因素。
≤0.04“±”     0.06~0.092和0.08~0.25“+”
0.26~0.5“++”  0.51~1.0“+++”    > 1.0“++++”

     

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