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對試劑盒供應商的選擇與產品評價總結

閱讀:321          發布時間:2014-12-25
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    大家知道ELISA是一種十分常用的定性定量方法,人體和動物、體外細胞培養中超過80%蛋白定量都使用其作為檢測的手段。今天我們來看看對試劑盒供應商的選擇與產品評價總結:
*、應用于臨床診斷的試劑盒
    必須有衛生部的許可文號,國家對應用于臨床診斷的試劑盒有嚴格的規定和要求,制定相關的手則來管理試劑盒的質量。
第二、用于科研的試劑盒
國家則沒有出臺相關的質量管理規定,因此試劑盒質量也就無法保障。在這種情況下,許多劣質的試劑盒在市面泛濫,不少同行戰友為此浪費了大量的時間和金錢,卻沒有得到一個良好的實驗結果。下面給戰友們介紹一下如何判斷試劑盒的質量,選購好的試劑盒。
1. 仔細閱讀說明書,對說明書的內容有一個詳細的了解。
2. 審查內容包括:
   ① ELISA試劑盒名稱一般由“物種+測定指標+酶聯免疫試劑盒",物種和測定指標不能搞錯,否則買錯了就是你的事情;另外有的試劑盒說明書試劑盒名稱明顯與寫在試劑盒上的名稱不符,這要引起你的警惕。
   ② 用途:應用于科研還是臨床診斷,用于臨床診斷的有衛生部的批準文號。
   ③ 測定原理:現在ELISA試劑盒除非是測定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數用的是增強的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統, 還有少數的指標可能使用競爭法,這類方法適用于半抗原的測定。具有復雜結構的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗,否則背景很高。當然 如果兩個都是單抗,那么測定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個用單抗,一個用多抗,測定的靈敏度會較高。某些簡單的化 合物用ELISA測定時,因為沒有兩個或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競爭法測定。如果你發現有測定簡單化合物用 雙抗體夾心法作測定原理時,這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區別。
一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色,即所 謂的“鉤狀效應",也就是我們在免疫沉淀試驗中所稱的“帶現象"。所以當使用一步雙抗體夾心法時,樣品濃度太高,有時會出現測不出來的現象,此時要作適當的稀釋才能準確測定。
   ④ 試劑盒的組成:用雙抗體夾心法作為測定的方法時,試劑盒的組成一般包括:已包被單抗的酶標板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開后有干燥劑,實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。

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