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技術(shù)文章

國產(chǎn)ELISA試劑盒如何包被

閱讀:2083          發(fā)布時間:2019-5-21

    恒遠(yuǎn)一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供專業(yè)的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實驗需求。的產(chǎn)品和完善的服務(wù)使我司在行業(yè)內(nèi)獲得了良好的口碑,并且發(fā)展成為國內(nèi)生物試劑和消耗品的企業(yè)之一。今天給大家講的是國產(chǎn)試劑盒是如何包被的,希望對做實驗是您,能有所幫助!

    已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2-8℃)干燥的條件下一般可保存6個月。有些不完整的試盒,僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被,下面來看看國產(chǎn)ELISA試劑盒如何正確包被的。

    將抗原或抗體固定在過程稱為包被。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。

    
    IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。
    
    間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少,僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射,以增加其吸附性能。
    
    固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴氨酸、魚精蛋白等作預(yù)包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

    以上內(nèi)容是由我司技術(shù)部人員為您整理的,希望對做實驗的同學(xué)們有所幫助,還需要了解更多詳細(xì)內(nèi)容請查看說明書或我們。另外,近期我司積分兌好禮活動火熱進(jìn)行中,還有預(yù)存返現(xiàn)哦,還在等什么,趕緊前來瞧瞧吧!

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