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技術文章

磷酸鹽緩沖液的配制方法

閱讀:1548          發布時間:2013-6-14

磷酸鹽緩沖液(Phosphate Buffered Saline,簡稱PBS)的是常用于生物學研究的一個緩沖溶液。PBS可以為三種溶液的英文縮寫,分別是磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution)、磷酸鹽緩沖鹽水(phosphate buffered saline)及 磷酸鹽緩沖鈉(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,發揮的生物學作用亦不*相同。

磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法:

稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調節溶液的pH值至7.4,zui后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘),保存存于室溫或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子只是用來調節滲透壓的。如果是用于免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調PH、定容、滅菌消毒。
 PH            7.6      7.4         7.2        7.0
H2O       1000     1000     1000     1000
NaCl         8.5      8.5        8.5         8.5
Na2HPO4 2.2      2.2       2.2         2.2
NaH2PO4 0.1      0.2       0.3         0.4

根據經驗來看,新鮮配置的PBS攪勻后其PH值約在7.2-7.4之間,可是在溫度的影響下,尤其在夏天,其電離常數發生了改變,在經過晝夜的時間后,PH值會明顯改變(我親自測過偏酸)。所以做實驗的同學可要注意了,PH值可能會影響實驗結果,甚至可能導致陰性。所以務必記得這個時候和天氣,要加強實驗條件控制問題。每次使用前用試紙測一下過夜了的PBS,如果發生偏酸或偏堿,注意重新換新液。

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