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細胞凋亡的檢測方法
閱讀：1518 發布時間：2013-7-12細胞凋亡也就是實驗中常說的程序性細胞死亡，它是一種不同于壞死的由基因調控的細胞主動性死亡過程，是細胞在一定的生理或病理狀態下，遵循自身的程序，自己結束自己生命的過程，zui后細胞脫落離體或裂解為若干凋亡小體，而被其他細胞吞噬。
檢測細胞凋亡的方法：
光學顯微鏡檢查：
細胞涂片或組織切片在PAS或HE染色后，即可在油鏡下觀察，若同時進行細胞免疫組化研究，則可判別AP細胞種類。
判斷標準：
①散在單個細胞。
②細胞體積縮小。
③輪廓清楚，常有一環形的空白區，胞漿嗜酸性。
④核濃縮，邊聚碎裂呈分散的嗜堿性塊。
⑤胞內凋亡小體。
⑥無炎癥反應。
電子顯微鏡檢查
電鏡是觀察細胞形態的方法。細胞核和細胞器亞微結構清晰易辨，尤其是電子顯微鏡與數字圖形處理系統結合可觀察到超微結構更細微的變化。雖然光學顯微鏡下可以看見胞膜起泡現象和凋亡小體，但凋亡細胞的形態學變化大多發生在超微結構，因此用光鏡觀察難以令人滿意，而透射電鏡可清楚地觀察到細胞結構在凋亡不同時期的變化。電鏡形態學觀察是迄今為止判斷凋亡zui經典、zui可靠的方法，被認為是確定細胞凋亡的金標準。Ap過程的重要變化是細胞染色體的碎片狀分解，細胞器變化和生物膜呈空泡狀。電鏡標本的制備同常規處理，電鏡下可見Ap細胞體積縮小，小體積細胞比例增高。細胞表面纖毛喪失，細胞核沿核膜內側邊緣開始固縮，電子密度升高。在初期細胞器仍保持完整。掃描電鏡下Ab小體的表面生物膜形成大量氣泡和空泡，呈沸騰狀和凹陷狀變化；透射電鏡下則呈圓形結構，內含多個或整個細胞器，也可含一部分細胞核。