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微載體培養的原理

閱讀:943          發布時間:2013-6-13

微載體培養技術(micro-carrier culture technique)于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。

微載體是指直徑60-250 μm,能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。。它是用固體小珠作為細胞附著載體進行細胞培養的一種技術。

微載體培養原理是將對細胞無害的微載體顆粒加入培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。 貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴增三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,因此細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。細胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附,這取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。

由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因此微載體培養在操作中對攪拌轉速及攪拌方式的要求都十分嚴格。微載體培養要求攪拌的速度非常慢,zui大速度75 r/min。細胞微載體培養通常分為三個時期:貼壁期,過渡期和培養期。貼壁期和過渡期可以使用超低速細胞磁力攪拌系統進行培養,該系統具有超低的攪拌速度,剪切力小且能在低速下充分混勻細胞。

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