詳細(xì)介紹
elisa kit elisa原理 人α半乳糖基抗體試劑盒
產(chǎn)品名稱:人α半乳糖基抗體試劑盒
英文名稱:Human α-galactoyl,Gal ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
保存條件:2-8℃
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
檢測(cè)范圍:詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
主要作用:科研
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
檢測(cè)目標(biāo):人,小鼠,大鼠,豚鼠,豬,犬,兔,牛,羊,猴,兔,馬等動(dòng)物種屬。
ELISA所用抗原有三個(gè)來(lái)源:天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動(dòng)物組織或體液、微生物培養(yǎng)物等,一般含有多種抗原成分,需經(jīng)純化,提取出特定的抗原成分后才可應(yīng)用,因此也稱提純抗原(purifiedantigen)。重組抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均為人工合成品,使用安全,而且純度高,干擾物質(zhì)少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術(shù)難度且要求較為昂貴的儀器設(shè)備和試劑,其應(yīng)用仍十分普遍,特別是對(duì)那些天然抗原不易得到的試驗(yàn),更顯出其獨(dú)到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的。抗血清成分復(fù)雜,應(yīng)從中提取IgG才可用于包被固相或酶標(biāo)記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高,有時(shí)可適當(dāng)稀釋后直接進(jìn)行包被。制備酶結(jié)合物用的抗體的質(zhì)量往往要求有較高的純度。經(jīng)硫酸銨鹽析純化的IgG可進(jìn)一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,則效果更好。
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
3.組織處理:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不公平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量**,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
上海恒遠(yuǎn)生物供應(yīng)科研類ELISA試劑盒,是多家科研機(jī)構(gòu)和高校ELISA試劑盒供應(yīng)商,質(zhì)量保證,*,產(chǎn)品范圍包括:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體實(shí)驗(yàn)和科研ELISA檢測(cè)試劑盒。公司提供免費(fèi)代測(cè),更好的為您服務(wù)。歡迎您。
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