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上海拜力生物科技有限公司

單克隆抗體定制|實驗技術服務

時間:2015-5-20閱讀:348

關鍵詞:單克隆抗體定制|實驗技術服務
簡介:世界*品牌單克隆抗體定制|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
單克隆抗體定制|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時,我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面,我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
免疫細胞化學的 技術關鍵之一是制備特異性強、親合力大、滴度高的特異性抗體,由于每種抗原都有幾個抗原決定簇,用它免疫動物將產生對各個決定簇的抗體,即多克隆抗體。單克隆抗體則是由一個產生抗體的細胞與骨髓瘤細胞融合而形成的雜交廇細胞經無性繁殖而來的細胞群所產生的,所以它的免疫球蛋白屬同一類型,質地純一,而且它是針對某一抗原決定簇的,因此特異性強,親合性也一致。
(一)動物的選擇與免疫
1.動物的選擇 純種BALB/C小鼠,較溫順,離窩的活動范圍小,體弱,食量及排污較小,一般環境潔凈的實驗室均能飼養成活。目前開展雜交瘤技術的實驗室多選用純種BALA/C小鼠。
2.免疫方案 選擇合適的免疫方案對于細胞融合雜交的成功,獲得高質量的McAb至關重要。一般在融合前兩個月左右根據確立免疫方案開始初次免疫,免疫方案應根據抗原的特性不同而定。
(1)可溶性抗原免疫原性較弱,一般要加佐劑,半抗原應先制備免疫原,再加佐劑。常用佐劑:福氏*佐劑、福氏不*佐劑。
初次免疫 抗原1~50μg加福氏*佐劑皮下多點注射或脾內注射(一般0.8~1ml,0.2ml/點)
↓3周后
第二次免疫 劑量同上,加福氏不*佐劑皮下或ip(腹腔內注射)(ip劑量不宜超過0.5ml)
↓3周后
第三次免疫 劑量同一,不加佐劑,ip(5~7天后采血測其效價)
↓2~3周
加強免疫,劑量50~500μg為宜,ip或iv(靜脈內注射)
↓3天后
取脾融合
目前,用于可溶性抗原(特別是一些弱抗原)的免疫方案也不斷有所更新,如:①將可溶性抗原顆粒化或固相化,一方面增強了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗原的使用量。②改變抗原注入的途徑,基礎免疫可直接采用脾內注射。③使用細胞因子作為佐劑,提高機體的免疫應答水平,增強免疫細胞對抗原的反應性。
(2)顆粒抗原免疫性強,不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。以細胞性抗原為例,免疫時要求抗原量為1~2×107個細胞。
初次免疫 1×107/0.5ml ip
↓2~3周后
第二次免疫 1×107/0.5ml ip
↓3周后
加強免疫(融合前三天)1×107/0.5ml ip或iv

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