詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | CD20樣蛋白抗體(造血干細胞4跨膜蛋白3) |
英文名稱 | CD20L |
規格 | 0.2ml |
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公司專業供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
水楊乙基己酯標準品Rat Aquaporin5 ELISA Kit純度:0.999
鹽布寧標準品Rat Aquaporin5 ELISA Kit純度:0.998
新生霉素標準品Rat Aquaporin4 ELISA Kit純度:0.994
那可標準品Rat Aquaporin4 ELISA Kit純度:0.999
去甲替林鹽鹽標準品Rat Aquaporin3 ELISA Kit純度:0.96
鹽去甲福林標準品Rat Aquaporin3 ELISA Kit純度:0.998
炔諾孕標準品Rat Aquaporin2 ELISA Kit純度:0.999
Porcine plaet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121557-200801TLC法鑒別老鸛草規格:2.0g
Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit豬氧化低密度蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121558-200801TLC法鑒別陳皮炭規格:0.5g
Porcine Tissue-type Plasimigen Actilyse,t-PA ELISA Kit豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒進口/分裝規格:96T/48T121559-200801TLC法鑒別粘委陵菜規格:1.0g
Porcine Tissue factor,TF ELISA Kit豬組織因子(TF)ELISA試劑盒進口/原裝規格:96T/48T121560-200601TLC法鑒別桃仁(山桃)規格:1.0g
Porcine Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 *規格:96T/48T121561-200801TLC法鑒別香櫞(枸櫞)規格:1.0g
Porcine Methemoglobin,MHB ELISA Kit豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒*規格:96T/48T121563-TLC法鑒別土壟大白蟻巢規格:
CD20樣蛋白抗體(造血干細胞4跨膜蛋白3)75mgHPD9*孔吸附樹脂84625-61-630964-13-796T抗原提呈關聯轉運蛋白(TAP)HPLC≥98%動力蛋白輕鏈1,細胞質檢測試劑盒20mgRANTES;CCL5957-75-5化學試劑G抗原1(GAGE1)15mgHPD950大孔吸附樹脂86386-73-496T188kDa核孔蛋白(NUP188)HPLC≥98%型肝炎病毒抗體檢測試劑盒10mgLAM957-75-5化學試劑巖藻糖激酶(FUK)
15mgHPD950大孔吸附樹脂86386-73-496T188kDa核孔蛋白(NUP188)HPLC≥98%型肝炎病毒抗體檢測試劑盒10mgLAM957-75-5化學試劑巖藻糖激酶(FUK)200mgHZ-803大孔吸附樹脂86386-73-4470-82-696T皮膚T-淋巴細胞關聯抗原(CTAGE)GC≥99%型肝炎病毒檢測試劑盒0.5mLLp-α957-75-5化學試劑四葉環化脫酶(FTCD)
200mgHZ-803大孔吸附樹脂86386-73-4470-82-696T皮膚T-淋巴細胞關聯抗原(CTAGE)GC≥99%型肝炎病毒檢測試劑盒0.5mLLp-α957-75-5化學試劑四葉環化脫酶(FTCD)1gHZ-818大孔吸附樹脂86386-73-4117-10-296T葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)HPLC≥98%型肝炎IgM檢測試劑盒20mgLp-PLA21022-79-3化學試劑法尼轉移酶β(FNTβ)
1gHZ-818大孔吸附樹脂86386-73-4117-10-296T葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)HPLC≥98%型肝炎IgM檢測試劑盒20mgLp-PLA21022-79-3化學試劑法尼轉移酶β(FNTβ)150mgHZ830大孔吸附樹脂61336-70-723513-15-796T神經激肽B(NKB)HPLC≥98%型肝炎IgG檢測試劑盒20mgLPL1022-79-3化學試劑糖-3-激酶(FN3K)
150mgHZ830大孔吸附樹脂61336-70-723513-15-796T神經激肽B(NKB)HPLC≥98%型肝炎IgG檢測試劑盒20mgLPL1022-79-3化學試劑糖-3-激酶(FN3K)250mgNKA大孔吸附樹脂61336-70-714113-05-496T神經降壓素(NT)HPLC≥98%酰膽酯酶檢測試劑盒20mgLPS611-53-0化學試劑形成素2(FMN2)