亚洲精品v欧美精品v日韩精品,久久综合九色综合欧美98,爱爱帝国亚洲综合社区区,欧美日韩一区二区三区免费,av专区在线精品一区,99久久精品国产免费,一本一本久久a久久综合精品蜜桃,亚洲精品91天天久久人人,欧美激情一区二区三区啪啪,亚洲精品无码久久久久久牛牛影视

歡迎來到化工儀器網請登錄|免費注冊|產品展廳|收藏該商鋪

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·14年

聯系電話

15800960770

您現在的位置：首頁> 技術文章 > 【感受態細胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態細胞

產品分類品牌

MicroBioLogics質控菌種

SGM指示劑

Moltox 遺傳毒性（Ames）試驗試劑

標準品

ATCC菌株

細胞株

細胞培養

免疫學

分子生物學

常規生化試劑

omega試劑盒

耗材和移液器

Roche

Qiagen

Promega

Merck-Millipore

Pierce

Amresco

R&D

CST

Sigma

invitrogen

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·14年

聯系人：: 周經理劉經理

電話：: 021-57730393

手機：: 15800960770

傳真：: 86-021-61496710

地址：: 上海市徐匯區宜山路520號中華門大廈18樓D座

個性化：: www.bnbiotech.com

網址：: www.bnbiotech.com

在線咨詢給我留言

掃一掃訪問手機商鋪

【感受態細胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態細胞

2013-5-15　　閱讀(2697)

分享：

1. 從37℃培養16~20 h 的新鮮平板中挑取一個單菌落（如大腸桿菌DH52），或1 ml 新鮮的16~20 h過夜培養物，轉到一個含有100ml LB培養基的1 L 或500 ml 培養瓶中。于37℃振搖培養約2~3 h（旋轉搖床200~300 r/min），每隔20~30 min測量OD₆₀₀值≈0.4。

2. 在無菌條件下將細菌轉移到一個，用冰預冷的50 ml 聚丙烯離心管中，冰上放置10~20 min。

3. 于4℃4000轉 /分離心10 min，回收細菌細胞。

4. 將管倒置1 min，以使zui后殘留的痕量培養液流盡。

5. 以10 ml 用冰預冷的0.1 mM CaCl₂重懸每份沉淀，放于冰上， 4℃4000轉 /分離心10 min，回收細菌細胞。

6. 每50 ml 初始培養物用2 ml 冰預冷的0.1 M CaCl₂重懸每份沉定，此時，可以迅速將細胞分裝成小份，液氮中冰凍，-70℃貯存備用。

7. 用無菌吸頭從感受態細胞懸液中取200 μl 轉移到無菌的微量離心管中，加DNA或連接反應混合物（體積≤10 μl，DNA≤50 ng），輕旋以混勻內容物，冰浴30 min。

8. 將離心管放到預加溫到42℃的水浴中，90 s。

9. 將混合物快速轉移到冰浴中，冷卻1~2分鐘，加入適當的培養基在37 ℃培養45 分鐘，使細胞復蘇，并表達質粒所攜帶的轉化基因。

10. 將適當體積（每個90 mm平板可達200 μl）已轉化的感受態細胞轉移到相應抗生素的平板培養基上。

11. 將平板置于室溫至液體被吸收，倒置平板于37℃培養箱中，12~16 h，平板培養，克隆在此期間應該出現，否則轉化不成功。

上一篇：【感受態細胞的制備】如何選擇進口高

下一篇：【感受態細胞的制備】電擊和熱擊感受

上海北諾生物科技有限公司 - 主營產品：免疫學,細胞學,分子生物學,微生物學,即用型試劑,常規生化試 ...

以上信息由企業自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責，化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。

15800960770

【感受態細胞的制備】 用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態細胞

會員登錄

收藏該商鋪

提示

【感受態細胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態細胞