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一、熱原(progon)醫院臨床在使用藥品注射劑時，常有發生冷感、寒戰、發熱、頭痛、惡心、嘔吐、膚色灰白、休克、嚴重時導致死亡，這種癥狀稱為熱原反應。為提高藥品質量和用藥安全，人們對熱原進行了廣泛的研究，直到1923年Seibert提出了用家兔檢測熱原的方法。在1942年美國藥典首先將家兔熱原檢查項收入藥典成為法定方法，中國藥典1953年版開始收載該方法，隨后的世界各國藥典都以動物熱原檢查法作為藥品質量監測的方法之一。家兔熱原檢查法的優點，可在規定時間里觀察到家兔的體溫變化，相應反應了熱原質引起
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細菌內毒素，英文稱作Enolotoxin，是G-菌細胞壁個層上的*結構，內毒素為外源性致熱原，它可激活中性粒細胞等，使之釋放出一種內源性熱原質，作用于體溫調節中樞引起發熱。內毒素的主要化學成分為脂多糖中的類脂A細菌內毒素這個概念在1890年的時候就已被提了出來，它是在研究發熱物質過程所引成的，1933年Boivinzui先由小鼠傷寒桿菌提取出來，進行化學免疫學方面的研究，到1940年時候，Morgan使用志賀氏痢疾菌闡明了細菌內毒素是由多糖脂質及蛋白質三部分所組成的復合體，到了1950年以后，隨
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實驗原理帶電荷的蛋白質，在電場中向著與其所帶電荷電性相反的電極泳動稱為電泳。血清中各種蛋白質的等電點不同，但大都在pH7以下，若將血清置于pH8.6的緩沖液中，則這些蛋白質均帶負電，在電場中都向陽極移動。由于各種蛋白質在同一pH環境中所帶負電荷多少及分子大小不同，所以在電場中向陽極泳動速度也不同。蛋白質分子小而帶電荷多者，泳動速度快；反之，則泳動速度慢。因此可將血清蛋白質依次分為清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白和g球蛋白五條區帶，經染色可計算出各血清蛋白質含量的百分數。以醋酸纖維薄
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實驗試劑TotalRNAKit：Omega：(Cat.No．R6834)FirstStrandcDNASynthesisKit：GeneCopoeia(Cat.No．C0210A)2xAllinOneTMQ-PCRMix：GeneCopoeia（cat.No．D0101A)Primersynthesis：invitrogen實驗設備RealTimePCR：ABI實驗材料樣品為5個人源的細胞培養液，其編號分別為：NO.I、No.2、No.3、No.4、No.5，其中為對照組，其它四個為不同的樣品組
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實驗原理1.DNA段回收方法：DN片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DN片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以把PCR產物插入到質粒載體的多克隆位點，可用于PCR產物的克隆和測序。實驗試劑1.pMDTM18-TSimpleVectorKit(Takara公司)2.
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實驗步驟首先引物與模板的序列要緊密互補，其次引物不能在模板的非目的位點引發DNA聚合反應(即錯配)，再次引物與引物之間避免形成穩定的二聚體或發夾結構。引物設計應注意如下要點：1．引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp。2．引物序列在模板內應當沒有相似性較高，尤其是3’端相似性較高的序列，否則容易導致錯配。引物3’端出現3個以上的連續堿基，如GGG或CCC，也會使錯誤引發機率增加。3．引物3’端的末位堿基對Taq酶的DNA合成效率有較大的影響。不同的末位堿基在錯配位置導致不同的擴增
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大腸桿菌亮氨酞-tRNA合成酶的E292對氨基酞化活性的作用
實驗試劑1.L-Leucine，ATP，DTT，焦磷酸鈉(tetrasodiumpyrophosphate)和HA-Ultrogel購自美國Sigma公司。2.[32p]-焦磷酸鈉購自美國杜邦公司。3.L-[I4C]-亮氨酸和DEAE-SepharoseTMFastFlow購自英國Amersham公司。4.限制性內切酶和T4DNA連接酶購自立陶宛MBIFerments公司。5.質粒pTrc-99B。實驗材料大腸桿菌LeuRS從高表達大腸桿菌菌株中純化得到實驗步驟1.突變體LeuRS基因的構建以構 -
實驗試劑氯仿[重慶川東化工集團有限公司]異丙醇[重慶川東化工集團有限公司]無水乙醇[重慶川東化工集團有限公司]異戊醇[上海化學試劑有限公司]溴酚藍[上海三愛思試劑有限公司]二甲苯氰FF[AmerscoCo.]溴化乙錠[AmerscoCo.]飽和酚(pH7.0)[Tianjin,H&YBio.Co.Ltd]TaqDNA聚合酶[Tianjin,H&YBio.Co.Ltd]十二烷基肌氨酸鈉[Tianjin,H&YBio.Co.Ltd]十二烷基硫酸鈉[Tianjin,H&YBio.Co.Ltd]三輕甲基
