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哈靈教你操作培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)的技巧
閱讀：1096 發(fā)布時(shí)間：2015-2-12*、添加劑的添加
1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類(lèi)添加的溫度都不應(yīng)太高。
2.定量：過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。
第二、培養(yǎng)溫度的掌握：
1.真菌類(lèi)：25-28℃培養(yǎng)
2.細(xì)菌類(lèi)：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
3.其他一般在36℃左右
第三、接種方法：常用的方法主要有劃線(xiàn)、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。
第四、革蘭氏染色方法：染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。
第五、劃線(xiàn)獲得單個(gè)菌落的方法。劃不出單個(gè)菌落的原因：
1.平板上有過(guò)多的水分;
2.劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。
3.多區(qū)劃線(xiàn)，三區(qū)或四區(qū)劃線(xiàn)。
第六、涂布和傾注的區(qū)別：
1.涂布利于觀察，但由于涂布棒上會(huì)帶有少量的菌液，影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
2.涂布更為準(zhǔn)確，但不利于觀察菌落的狀態(tài)。
第七、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題：
1.滅菌溫度要嚴(yán)格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過(guò)高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量。
2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分。
3.培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌，反復(fù)滅菌也會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分的破壞。
4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻。
第八、板的保存：大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
第九、觀察時(shí)間的掌握
按SN、GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說(shuō)明所述時(shí)間進(jìn)行觀察，時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，李氏菌使整個(gè)平板成黑色，不利于觀察單個(gè)菌落。
第十、生化實(shí)驗(yàn)
1.接種的方法;
2.氧化型和發(fā)酵型實(shí)驗(yàn)操作;
3.陽(yáng)性菌種的對(duì)照;
4.接種前的純化。挑取單個(gè)菌落進(jìn)行一系列的生化。
第十一、關(guān)于殺菌的幾個(gè)概念
1.抑制：是在亞抑制劑量因子作用下導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)停止，但在移去這些因子后生長(zhǎng)仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。
2.死亡：在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長(zhǎng)時(shí)間的作用下，導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)能力不可逆喪失，即使移去這種因子后生長(zhǎng)仍不能恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。
3.防腐：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它能防止食物腐敗或防止食物霉變。
4.消毒：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施，它可以起到防止感染和傳播的作用。
5.滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有病原微生物的一種措施。
6.化療：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)，例磺胺、抗生素等對(duì)生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞進(jìn)行治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但對(duì)有機(jī)體無(wú)毒害作用的治療措施。
第十二、產(chǎn)品的保存：
1.干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用。
2.亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時(shí)，要常溫解凍，避免水浴加熱。
3.抗生素類(lèi)：冷藏保存，溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。
4.兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。