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技術(shù)文章

ELISA的原理以及ELISA的基本類型

閱讀:1163          發(fā)布時(shí)間:2016-1-14

971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。 
 

ELISA的原理 
 

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。 
 

進(jìn)行檢測(cè)時(shí),樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過(guò)洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,此時(shí),能固定下來(lái)的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過(guò)加入與酶反應(yīng)的底物后顯色,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量,進(jìn)行定性或定量的分析。 
 

由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。 
 

ELISA的基本類型 
 

ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:

1.  固相的抗原或抗體;

2.  酶標(biāo)記的抗原或抗體;

3.  酶作用的底物。

根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。 

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