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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A試劑盒說明書

閱讀:1222          發布時間:2015-5-19
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主要用途


 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物,在還原酶的催化下,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH)氧化后吸光峰值的降低即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的其適用于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解懸液、微粒體,或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性檢測,以及抑制劑篩選。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。


技術背景


甲戊二羥酸通路(mevalonate pathway),又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路,是所有高等真核生物和許多細菌具有的重要的細胞代謝通路,用于體內產生二甲基丙烯焦磷酸(dimethylallyl pyrophosphate;DMAPP)和異戊二烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate;IPP)作為生物大分子合成的基礎,包括蛋白質異戊二烯化、細胞膜維護、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductaseHMGR;EC1.1.1.34)是控制甲戊二羥酸通路的關鍵的酶,調節膽固醇和類異戊二烯脂分子的產生。HMG-COA還原酶位于內質網膜上,含有8個跨膜結構域,其中活性結構域在細胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標,包括lovastatin (Mevacor)、atorvastatin (Lipitor)、pravastatin(Pravachol)和simvastatin(Zocor)。在植物組織中,HMG-COA還原酶位于質體、線粒體和內質網上,含有2個跨膜結構域,組織發育、光照、病原菌感染、創傷等將誘導HMG-COA還原酶活性增加。HMG-COA還原酶的催化下,將4個電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原為甲戊二羥酸(mevalonate),同時產生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphateNADPH)被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphateNADP),其氧化后吸光峰值變化(340nm 波長),來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶反應系統為:

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