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40805ES02Hieff Trans懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 40805ES02 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1751更新時(shí)間：2022-03-22 15:36:21
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 40805ES02 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
以無菌的液體形式提供。
產(chǎn)品介紹
Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent
Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價(jià)格元 | * |
Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40805ES02 | 0.5ml | 4℃ | 948.00 | 598.00 |
40805ES03 | 1.0ml | 4℃ | 1678.00 | 998.00 | |
40805ES08 | 5×1ml | 4℃ | 5268.00 | 3698.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，經(jīng)優(yōu)化專門用于懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，且適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染，對大多數(shù)真核細(xì)胞具有很高的轉(zhuǎn)染效率。
Hieff TransTM懸浮細(xì)胞脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑以無菌的液體形式提供。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋（wet ice）運(yùn)輸。產(chǎn)品4oC保存，一年有效。不可冷凍！
注意事項(xiàng)
1. 為得到*的轉(zhuǎn)染效率，請先用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent（以下簡稱Hieff TransTM），之后與DNA或RNA做混合。
2. 使用高質(zhì)量的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，務(wù)必確保質(zhì)粒的高純度和無菌狀態(tài)，*去除質(zhì)粒提取過程中可能殘留的苯酚和高鹽，因?yàn)樯鲜龇宇悤?xì)胞造成損失，而高鹽分會干擾“Hieff TransTM-復(fù)合物"的形成。質(zhì)粒中的內(nèi)毒素也是轉(zhuǎn)染的大敵，務(wù)必去除。
3. 轉(zhuǎn)染時(shí)培養(yǎng)基中不能添加抗生素。
4. 陽離子脂質(zhì)體應(yīng)該在4℃保存，要注意避免多次反復(fù)長時(shí)間開蓋，因?yàn)榭赡軙?dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。
5. 需優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到zui大的轉(zhuǎn)染效率。DNA和Hieff TransTM的比例，通常推薦是1:2 或者1:3。
推薦轉(zhuǎn)染條件（以293懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染為例）
zui終轉(zhuǎn)染體積：30ml
轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)目：3×107 cells（zui終細(xì)胞密度：1×106 cells/ml），轉(zhuǎn)染之前需要確保細(xì)胞健康，細(xì)胞活力>90%。
質(zhì)粒DNA量：20–40 μg (typically use 30 μg)
轉(zhuǎn)染試劑量：40–80 μL (typically use 60 μL). Use 2 μL Hieff TransTM per 1 μg of plasmid DNA transfected.
操作步驟（293懸浮細(xì)胞）
使用以下步驟在30ml總體系內(nèi)轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，轉(zhuǎn)染過程中生長培養(yǎng)基內(nèi)不要添加抗生素，否則會降低轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染過程請同時(shí)設(shè)置陽性對照組和陰性對照組（無DNA，無Hieff TransTM）。
【注】對于其他的培養(yǎng)總體系，按比例放大或者縮小各組分用量。
1. 轉(zhuǎn)染當(dāng)天，在配制復(fù)合物之前，準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染需要的細(xì)胞量【見上推薦轉(zhuǎn)染條件，即28ml 生長培養(yǎng)基內(nèi)加入3×107 cells，臺盼藍(lán)排斥法確定細(xì)胞活力和小量細(xì)胞成團(tuán)量。劇烈漩渦混勻45s以打破細(xì)胞團(tuán)，并用計(jì)數(shù)器測定總細(xì)胞量。細(xì)胞活力需>90%。】 【注】：為了達(dá)到*效率，確保單細(xì)胞懸液。
2. 按照以下方法配制Hieff TransTM-DNA復(fù)合物，
a, 用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）稀釋30μg質(zhì)粒DNA，使其終體積為1ml；
b, 用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）稀釋60μl Hieff TransTM，使其終體積為1ml；輕輕混勻，于室溫孵育5min；【注意】：過長時(shí)間孵育會降低效率。
c, 孵育5min之后，將稀釋的質(zhì)粒DNA加入稀釋的Hieff TransTM，使其總體積為2ml。輕輕混勻。
d, 室溫孵育20-30min，使得DNA-Hieff TransTM復(fù)合物形成。此時(shí)溶液可能會混濁，但不會影響轉(zhuǎn)染。
【注意】：DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物室溫至少穩(wěn)定保存5h。
3. 孵育*后，將2ml DNA-Hieff TransTM復(fù)合物加入28ml 含293懸浮細(xì)胞的生長培養(yǎng)基內(nèi)，使得細(xì)胞zui終的密度約為1×106 cells/ml。對于陰性對照，用2ml無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）替換。
4. 37℃，8% CO2軌道搖床培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速125rpm，直至進(jìn)行轉(zhuǎn)基因表達(dá)分析，無需去掉復(fù)合物或更換培養(yǎng)基。然而，可能有必要在4-6h后更換生長培養(yǎng)基，不會降低轉(zhuǎn)染活性。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格元 | *元 |
40801ES04 | HG_TransGeneTM tranfection reagent | 1.5ml | 3000.00 | / |
40802ES01 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 100μl | 168.00 | 118.00 |
40802ES02 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml | 738.00 | 488.00 |
40802ES03 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 1.0ml | 1308.00 | 868.00 |
40802ES08 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 5×1ml | 4878.00 | 3248.00 |
40803ES70 | Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑 | 200T | 298.00 | / |
40804ES76 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） | 500μl | 180.00 | / |
40804ES86 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） | 5×500μl | 500.00 | / |
40805ES01 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 100ul | 228.00 | 178.00 |
40805ES02 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 0.5ml | 948.00 | 598.00 |
40805ES03 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 1.0ml | 1678.00 | 998.00 |
40805ES08 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 5×1ml | 5268.00 | 3698.00 |
