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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥 |
|---|
產品介紹
產品詳情
產品介紹
本產品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體 T7 RNA 聚合酶，是對野生型T7進行了改造優化，突變得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 啟動子序列的雙鏈 DNA 為模板，以 NTP 為底物，合成與啟動子下游的反向單鏈 DNA 互補的RNA。雙鏈線性平末端或 5’突出末端 DNA均可作為 T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此線性質粒、PCR 產物均可用作體外合成 RNA 的模板。
本產品按照GMP規定生產，以液體形式提供。
產品特色
1. 高效低dsRNA合成
dsRNA含量顯著降低：與傳統T7 RNA聚合酶相比，dsRNA含量降低了至少10倍以上，有效避免了dsRNA引發的免疫激活和對mRNA功能的干擾。
高產量：mRNA產量穩定在9mg/mL以上，滿足大規模生產的需要。
高完整度：轉錄產物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶，確保mRNA的質量和功能。
2. 高效加帽與低投入
高加帽率：片段加帽率均超過99%，確保mRNA的穩定性和翻譯效率。
低Cap analog投入量：在不同片段長度下，Cap analog投入量降低至2.5mM，仍能實現優異的加帽率，顯著降低了生產成本。
3. 優化的篩選與驗證
雙重篩選策略：通過構建隨機文庫與FADS高通量篩選方法，以及半理性設計與微孔板技術，篩選出超過10^6的隨機突變文庫，最終選出一款性能的突變體進行商品化應用。
產品特性：
| 來源 | 重組 E. coli |
| 最適溫度 | 37℃ |
| 活性 | 250 U/μL |
| 宿主核酸殘留 | <10 fg/U |
| 宿主蛋白殘留 | <50 ppm |
| RNA 酶殘留 | 陰性 |
| 儲存緩沖液 | 50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
| 活性單位定義 | 在 37℃、pH8.0 的條件下，1 h 內使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為一個活性單位。 |
應用案例
1、 在不同長度的應用場景下，均能顯著性降低dsRNA 含量
| 片段長度 | T7 RNA pol | 產量（mg/mL） | 完整度（%） | dsRNA含量（(1ug RNA產生 ng的dsRNA) |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| 競品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| 競品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
2、Cap analog的投入量可以大幅降低
| Cap analog投入量（mM） | 加帽率（%）-4K | 1K | |
| WT | mutant | WT | |
| 10 | 100 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 | 99.7 |
在不同的片段長度，Cap analog的投入量降低到2.5mM， 仍能得到優異的加帽率。同時在細胞層面上，也能得到優異的表現（見下圖）
存儲條件
-25 ~ -15℃保存，有效期1年。
